24小时热门版块排行榜    

查看: 4376  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

A张盈

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求助RNA提取电泳图分析 已有4人参与

有哪位大神帮忙分析下,我是提的放线菌中的RNA,第一个胶孔是2000的maker,总感觉跑出的条带对应的大小不太对,哪位大神帮忙分析下,谢谢
求助RNA提取电泳图分析
IMG_20150929_112015.jpg
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liping121200

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
3楼说的比较好,你提的RNA降解的比较厉害,可以先试着做后续的实验,我之前提的也有降解的,有的也是可以用的,如果没有结果,重新提取RNA过程中在4度离心时速度要大一点,我们一般是12000转,这样会减少杂质的残留污染,另外提RNA尽量速度快一点,减少空气流动就好,外部装备像穿实验服戴口罩这些影响没那么严重,少说话就行,戴口罩比较好,RNA跑之前在70℃进行10min变性,电压80v跑电泳3min感觉不行吧,三个条带根本跑不开,40min可以的,你可以在20分钟左右拿出来看一下条带怎么样,你1%的胶就可以了,没必要加大浓度
好好学习,天天向上
11楼2015-09-30 17:12:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

然处

金虫 (小有名气)

rna有些降解,分子大小的话,用marker对比也不太正确,毕竟dna和rna还有有结构上的差别的

发自小木虫Android客户端
迷茫会结束的
2楼2015-09-29 16:58:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dorecnu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-09-29 22:34:38
理想的RNA提取条带应该是三条28S,18S,5S亮度上应该依次减弱28S最亮,18S次之,5S最弱。但是在实际试验中我们往往只能获得两条条带,这取决于你后续的实验精度要求,如果是普通的定量PCR的话,我倒是建议你先将这个RNA反转录进行后续的实验,看看结果如何。有的物种RNA提取条带因为复杂的原因不能呈现典型的三条带,但并不影响后续的实验。我就有师姐一直纠结与RNA条带不清晰,但是我们后续进行芯片杂交的时候发现也能满足分析的要求。所以我也建议你先进行后续的实验看看,莫纠结。另外,从电泳图上看,凝胶孔有杂质,是蛋白污染的可能性比较大,所以建议你采取相应的前处理措施。
3楼2015-09-29 17:08:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DanceMacabre

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-29 22:34:58
胶的浓度,配1.5的胶。电泳时间,3min。RNA提取过程,在冰上低温;加乙醇洗涤后,加水溶解时,在超净台搞。做实验时,穿实验服,戴口罩。结果包你满意。

发自小木虫Android客户端
4楼2015-09-29 17:55:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 6/300 2026-08-08 10:19 by 3OOjAIS77qg2
[基金申请] fileCode有新解读? +8 Tide man 2026-08-08 16/800 2026-08-08 09:59 by Tide man
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 5/250 2026-08-08 08:59 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 4/200 2026-08-08 08:21 by 6vVgjDL4CnGu
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 3/150 2026-08-08 03:47 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +9 且听虎啸 2026-08-07 12/600 2026-08-07 21:53 by 理想三旬2025
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[论文投稿] 十年后又回来了,论文投稿求助 +4 哈哈114477 2026-08-01 4/200 2026-08-07 14:39 by jgy194592
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +4 yang182083 2026-08-06 6/300 2026-08-07 12:43 by 虫友是什么虫
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 有没有H口的?有收到消息的吗? +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 纯娱乐,不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 什么时候能放榜呀? +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
请填处理意见