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A张盈

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求助RNA提取电泳图分析 已有4人参与

有哪位大神帮忙分析下,我是提的放线菌中的RNA,第一个胶孔是2000的maker,总感觉跑出的条带对应的大小不太对,哪位大神帮忙分析下,谢谢
求助RNA提取电泳图分析
IMG_20150929_112015.jpg
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DanceMacabre

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by A张盈 at 2015-09-29 19:12:32
胶的浓度用的1%的胶,电泳时用的80V,将近40min...

电泳条件就用你实验室常规跑质粒的条件,一般是跑1地暖yig0-15min对应的那个电压电流。跑RNA时只跑3-5min。切记。跑久了,

发自小木虫Android客户端
9楼2015-09-29 19:29:53
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查看全部 15 个回答

然处

金虫 (小有名气)

rna有些降解,分子大小的话,用marker对比也不太正确,毕竟dna和rna还有有结构上的差别的

发自小木虫Android客户端
迷茫会结束的
2楼2015-09-29 16:58:58
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dorecnu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-09-29 22:34:38
理想的RNA提取条带应该是三条28S,18S,5S亮度上应该依次减弱28S最亮,18S次之,5S最弱。但是在实际试验中我们往往只能获得两条条带,这取决于你后续的实验精度要求,如果是普通的定量PCR的话,我倒是建议你先将这个RNA反转录进行后续的实验,看看结果如何。有的物种RNA提取条带因为复杂的原因不能呈现典型的三条带,但并不影响后续的实验。我就有师姐一直纠结与RNA条带不清晰,但是我们后续进行芯片杂交的时候发现也能满足分析的要求。所以我也建议你先进行后续的实验看看,莫纠结。另外,从电泳图上看,凝胶孔有杂质,是蛋白污染的可能性比较大,所以建议你采取相应的前处理措施。
3楼2015-09-29 17:08:10
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DanceMacabre

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-29 22:34:58
胶的浓度,配1.5的胶。电泳时间,3min。RNA提取过程,在冰上低温;加乙醇洗涤后,加水溶解时,在超净台搞。做实验时,穿实验服,戴口罩。结果包你满意。

发自小木虫Android客户端
4楼2015-09-29 17:55:46
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