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郭帅411422

新虫 (小有名气)

[求助] PCR 跑完 条带就这样 已有11人参与

想问一下

样1  样2  这样的 是什么情况?
如何解决?

PCR 跑完 条带就这样
IMG_20150914_195740.jpg
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976592787

木虫 (正式写手)

国家自然科学基金委员会委员长

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香,分子生物期待您更多精彩。 2015-09-15 19:15:48
你这是啥啊?说清楚是反转录提取的cDNA还是基因全长啊,如果是某个基因pcr跑胶的图片,可能引物设计有问题,因为没有特异性条带,都是引物p出来的的非特异性带

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耻与众草之为伍,何亭亭而独芳!何不为人之所赏兮,深山穷谷委严霜。
3楼2015-09-14 22:18:00
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普通回帖

fiona617617

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香,分子生物期待您更多精彩。 2015-09-15 19:15:41
这是基因组DNA还是单一的扩增产物?基因组DNA,片段碎了,完全有可能;单一产物,那肯定引物特异性有问题;若是质粒,那抽提得不干净,需纯化
2楼2015-09-14 22:10:11
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viki_MDK

银虫 (正式写手)

问题不够详细
4楼2015-09-15 11:07:13
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Esther_zhang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香,分子生物期待您更多精彩。 2015-09-15 19:15:55
首先,你要重新做一块胶再跑一次看看。。。。。。。
5楼2015-09-15 11:12:18
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郭帅411422

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fiona617617 at 2015-09-14 22:10:11
这是基因组DNA还是单一的扩增产物?基因组DNA,片段碎了,完全有可能;单一产物,那肯定引物特异性有问题;若是质粒,那抽提得不干净,需纯化

我这是 DNA ---样品PCR-----照胶------ 就这样
求解下一步杂么做?
如何避免?
大神
6楼2015-09-15 12:11:17
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郭帅411422

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 976592787 at 2015-09-14 22:18:00
你这是啥啊?说清楚是反转录提取的cDNA还是基因全长啊,如果是某个基因pcr跑胶的图片,可能引物设计有问题,因为没有特异性条带,都是引物p出来的的非特异性带

你好 我用的是 真核生物通用引物ITS2
我现在要做的是:找样品这个属的通用引物吗?
还是杂么做?  大神 新人求解
7楼2015-09-15 12:16:35
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EveryEven

铜虫 (小有名气)

都是在一块胶上跑的吗?旁边那个清楚的,你marker跑得怎么样

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8楼2015-09-15 12:48:47
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EveryEven

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香,分子生物期待您更多精彩。 2015-09-15 19:16:03
如果一块胶上跑的有的清楚有的不清楚那很有可能是样本的问题,如果都不清楚那估计就是胶配得有问题或者电泳设置有问题吧。个人经验,仅供参考

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9楼2015-09-15 12:51:17
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wx3280065

银虫 (小有名气)

额,你胶加染料了吗?我上次跑胶忘了加eb出来跟你这好像……

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10楼2015-09-15 12:57:26
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