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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 有关聚丙烯胶的问题请教大神助我
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Tina_Paris

铁虫 (小有名气)

[求助] 有关聚丙烯胶的问题请教大神助我 已有1人参与

鄙人最近在做分子实验，之前没有接触过分子实验，现在学习一波三折啊，先是琼脂糖凝胶电泳做了5次，Maker终于亮了，我认为是EB的问题，因为在我全部更换电泳液和跑PCR之后，maker依旧不亮，后来用了另外一个实验室的EB，maker亮了。我也做过对比实验，就是人家实验室的EB才会出现亮亮的maker，但是师兄用我们实验室的EB竟然maker是亮的，狠狠的打击了我啊，他依旧认为是我琼脂糖胶做的不好。敢问大神，这是什么原因？
本人主要想问的是聚丙烯的问题，我的聚丙烯带跑的浓眉大眼的，52孔梳子。有时侯梳子孔附近的胶还不会凝固（剩下的胶已经凝固），导致胶孔是参次不齐的。我加大AP和TEMED的量，解决了梳子孔不凝固问题，但是胶孔还是很丑，看论坛说参次不齐的胶孔是因为拔梳子时候用力不均，我是双手慢慢拔起的，不知有何诀窍？难道是这个原因吗？我问了其他人，聚丙烯胶的配比和银染的方法配比都是正确的，不知道为什么我的胶图那么丑，上图！请大神过目，分析下，谢谢。

有关聚丙烯胶的问题请教大神助我
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有关聚丙烯胶的问题请教大神助我-1
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有关聚丙烯胶的问题请教大神助我-3
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如果巴黎不快乐，不如回到我身边！&~不抱怨的世界
1楼 2015-07-08 19:52:56
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tanjunxia

新虫 (初入文坛)
为什么我用银染染不出条带

发自小木虫Android客户端
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5楼2019-12-19 00:34:32
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Tina_Paris: 金币+5 2015-07-14 11:56:42
真是够丑的，可以尝试粗孔的呢，胶酶制好，但是应该是试剂的问题，AP和TMED不能再空气中待时间长，最好少量分装，你试试吧，换新的试剂配置看看，还有就是你的样品貌似也没有处理好，marker还算过得去，，，哎，自己摸索摸索吧
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
2楼2015-07-10 10:23:34
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Tina_Paris

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-07-10 10:23:34
真是够丑的，可以尝试粗孔的呢，胶酶制好，但是应该是试剂的问题，AP和TMED不能再空气中待时间长，最好少量分装，你试试吧，换新的试剂配置看看，还有就是你的样品貌似也没有处理好，marker还算过得去，，，哎，自己 ...

谢谢阿，我换了一下AP，胶是能制好了 ，但是胶跑的弯曲，也是醉了，谢啦
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如果巴黎不快乐，不如回到我身边！&~不抱怨的世界
3楼2015-07-14 11:57:53
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Tina_Paris

铁虫 (小有名气)
闲来无事，自己回复下，现在已能做好胶。是因为试剂问题，所以做的胶才会那么丑，胶孔不均匀，胶不凝的问题。其他对制胶的要求很低。
有关聚丙烯胶的问题请教大神助我-4
48-M-50-51-52-54c2.jpg
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如果巴黎不快乐，不如回到我身边！&~不抱怨的世界
4楼2015-11-26 21:09:05
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