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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 梯度PAGE胶的配制问题
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aoda123

木虫 (正式写手)

[求助] 梯度PAGE胶的配制问题已有1人参与

哪位大神配过跑蛋白用的SDS-PAGE梯度胶，请教配制方法和跑胶方法！！
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身体健康，工作顺利
1楼2014-11-13 19:49:30
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zhangy18

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
aoda123: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-11-14 20:13:43
梯度胶配制需要有配胶器，就是个连通器，其中一个有下方出口，可以将混合好的液体流出放置到玻璃杯中间，一般都是线性梯度胶，连通器两个容器中分别放置等体积（体积为玻璃板空隙体积的1/2）的梯度胶的初始浓度胶，若4%-12%，其中一个放4%，另一放12%，浓度高的胶放在有出口的胶中，灌胶器中需放置搅拌子，时时混匀.
跑胶使用单一电压即可，其余同普通单一浓度胶
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2楼2014-11-14 10:16:40
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aoda123

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhangy18 at 2014-11-14 04:16:40
梯度胶配制需要有配胶器，就是个连通器，其中一个有下方出口，可以将混合好的液体流出放置到玻璃杯中间，一般都是线性梯度胶，连通器两个容器中分别放置等体积（体积为玻璃板空隙体积的1/2）的梯度胶的初始浓度胶， ...

在灌胶的时候担心胶会凝固在管子中，怎么避免呢？
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身体健康，工作顺利
3楼2014-11-14 12:37:08
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aoda123

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhangy18 at 2014-11-14 04:16:40
梯度胶配制需要有配胶器，就是个连通器，其中一个有下方出口，可以将混合好的液体流出放置到玻璃杯中间，一般都是线性梯度胶，连通器两个容器中分别放置等体积（体积为玻璃板空隙体积的1/2）的梯度胶的初始浓度胶， ...

我用连通器配制的胶（6%-20%），跑蛋白后条带不均一，出现了笑脸，会是什么原因呢？

另外，你说把混好的胶放到烧杯中是什么意思，是不是用连通器混匀以后流到烧杯中，再拿烧杯中的胶去灌胶板呢？
梯度PAGE胶的配制问题
梯度胶结果.jpg
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身体健康，工作顺利
4楼2014-11-19 09:57:29
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