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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于聚丙烯酰胺凝胶的问题
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诸葛门徒2013

新虫 (初入文坛)

[交流] 关于聚丙烯酰胺凝胶的问题 已有8人参与

现在在跑8%的聚丙烯酰胺凝胶电泳，可是第一步制胶就出现了问题，制胶时需要的各种液体都是事先配制好的（配制有一个月了）之前用着还好，这两次用的时候，每次都是等四个小时拔梳子时还是凝固的不好，拔出的很多孔都不完整，梳子各个齿之间的液体完全没凝固，之前以为是加促凝剂太少，然后多加了也还是不行，四个小时后去看还是液体！！！请问各位大神遇到过这种情况么，都怎么解决的！！！
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1楼 2014-11-03 15:56:06
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dongdekun

新虫 (初入文坛)
★
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一般情况都是AP的问题，AP现配现用（10%AP配制很容易的），我配好使用从不超过一个星期。
现在的温度，一般非变性胶半个小时就可以凝固好了。
冬天温度低的时候，凝固是比较慢的，容易形成点样孔不太完整，可以适当加温（比如吹风机吹吹。。。）。
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4楼2014-11-03 23:24:33
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badman20

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-03 18:04:41
可能是APS失效了，重新配一瓶试试！
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2楼2014-11-03 16:42:51
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张冰宝

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-03 18:04:52
你是配制上面的浓缩胶时出现不凝的是吗？首先你要确定AP没有问题。然后排除这个以后，你要测一下你用的水的ph值，我遇到过这种情况，试了半个月。最后发现是水的ph偏酸导致的不凝。
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3楼2014-11-03 17:38:38
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1545810278

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
是不是你们催化剂失效了？要么就是PAGE的问题 倒了重新配下
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5楼2014-11-04 22:34:42
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cnzpli

金虫 (正式写手)
★
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AP问题 换掉就好了

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6楼2014-11-05 10:06:11
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诸葛门徒2013

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by badman20 at 2014-11-03 16:42:51
可能是APS失效了，重新配一瓶试试！

恩，谢谢了，明天新配下试试！！！
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7楼2014-11-05 19:43:47
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诸葛门徒2013

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 张冰宝 at 2014-11-03 17:38:38
你是配制上面的浓缩胶时出现不凝的是吗？首先你要确定AP没有问题。然后排除这个以后，你要测一下你用的水的ph值，我遇到过这种情况，试了半个月。最后发现是水的ph偏酸导致的不凝。

好吧 ，我是十月初配的液体，然后之前用了之后一直在四度放着！！！这次用就一直不凝！！APS和temed都是促凝的吧，会不会是temed的问题呢？
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8楼2014-11-05 19:45:54
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诸葛门徒2013

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by dongdekun at 2014-11-03 23:24:33
一般情况都是AP的问题，AP现配现用（10%AP配制很容易的），我配好使用从不超过一个星期。
现在的温度，一般非变性胶半个小时就可以凝固好了。
冬天温度低的时候，凝固是比较慢的，容易形成点样孔不太完整，可以适 ...

好吧 ，看来是我放的太久了！！！
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9楼2014-11-05 19:46:23
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诸葛门徒2013

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 1545810278 at 2014-11-04 22:34:42
是不是你们催化剂失效了？要么就是PAGE的问题 倒了重新配下

恩，谢谢回复，我重配试试！！！
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10楼2014-11-05 19:46:48
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