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Tina_Paris

铁虫 (小有名气)

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专业: 生物信息学

[求助] 有关聚丙烯胶的问题请教大神助我已有1人参与

鄙人最近在做分子实验，之前没有接触过分子实验，现在学习一波三折啊，先是琼脂糖凝胶电泳做了5次，Maker终于亮了，我认为是EB的问题，因为在我全部更换电泳液和跑PCR之后，maker依旧不亮，后来用了另外一个实验室的EB，maker亮了。我也做过对比实验，就是人家实验室的EB才会出现亮亮的maker，但是师兄用我们实验室的EB竟然maker是亮的，狠狠的打击了我啊，他依旧认为是我琼脂糖胶做的不好。敢问大神，这是什么原因？
本人主要想问的是聚丙烯的问题，我的聚丙烯带跑的浓眉大眼的，52孔梳子。有时侯梳子孔附近的胶还不会凝固（剩下的胶已经凝固），导致胶孔是参次不齐的。我加大AP和TEMED的量，解决了梳子孔不凝固问题，但是胶孔还是很丑，看论坛说参次不齐的胶孔是因为拔梳子时候用力不均，我是双手慢慢拔起的，不知有何诀窍？难道是这个原因吗？我问了其他人，聚丙烯胶的配比和银染的方法配比都是正确的，不知道为什么我的胶图那么丑，上图！请大神过目，分析下，谢谢。

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如果巴黎不快乐，不如回到我身边！&~不抱怨的世界

1楼 2015-07-08 19:52:56

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Tina_Paris

铁虫 (小有名气)

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引用回帖:

2楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-07-10 10:23:34
真是够丑的，可以尝试粗孔的呢，胶酶制好，但是应该是试剂的问题，AP和TMED不能再空气中待时间长，最好少量分装，你试试吧，换新的试剂配置看看，还有就是你的样品貌似也没有处理好，marker还算过得去，，，哎，自己 ...

谢谢阿，我换了一下AP，胶是能制好了，但是胶跑的弯曲，也是醉了，谢啦