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1030694963

银虫 (小有名气)

[求助] 液相峰形奇怪

各位虫友大家好,我有一个样品在254和280nm下出峰异常,不是那种很规矩的峰,是那种类似三角形的峰,不知道虫友们有没有遇到过类似的情况。是我样品的问题还是流动相的问题呢?我流动相是用90%甲醇洗脱的,也从20%甲醇试过,前面基本上没有峰,就改为90%甲醇了,希望广大虫友多给建议,拜托拜托!!

液相峰形奇怪
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液相峰形奇怪-1
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 1030694963 at 2015-06-23 11:04:46
是什么物质我不清楚,因为是在分离真菌代谢物。样品是溶在甲醇里的,甲醇峰不会这么高吧,响应值有30-40呢...

代谢产物过于复杂,不知道样品有没有经过前处理,如果直接用甲醇溶解进样,估计是难以改善的。建议先从样品前处理下功夫。
归零
6楼2015-06-23 11:39:51
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 1030694963 at 2015-06-23 14:16:16
哦,我的样品TLC点板,展开剂用氯仿:甲醇5:1,显示一个点,所以我才打液相看一下纯度如何,没想到峰这么奇怪,是个三角形,而且在两种波长下都是这样,是不是上样量大啦,但是响应值也没有很高啊...

先走一针空白溶剂试试吧
归零
8楼2015-06-23 17:00:02
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xinmengfly

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
1030694963: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-06-25 11:11:08
10min以后出峰应该不是溶剂峰,有可能1)溶剂:建议选择初始流动相或者高比例有机相,点板的样品可以氮气吹干再复溶(2)色谱柱或流动相条件不合适:根据样品性质选择合适的色谱柱,流动相加点改性剂或许有用。建议参考文献条件
13楼2015-06-24 13:27:58
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普通回帖

klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
1030694963: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-06-23 18:34:36
麻烦告知样品类型及溶剂。有可能是溶剂导致的。但用90%的甲醇比例有点高了,相当于冲洗色谱柱了。可以试试进一针空白看看。
归零
2楼2015-06-23 08:59:22
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七月七月99

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
1030694963: 金币+5, 有帮助 2015-06-23 18:34:08
像是柱子的问题,柱子的选择性不行,更换另外的柱子试试!
3楼2015-06-23 10:47:47
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1030694963

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by klicking at 2015-06-23 08:59:22
麻烦告知样品类型及溶剂。有可能是溶剂导致的。但用90%的甲醇比例有点高了,相当于冲洗色谱柱了。可以试试进一针空白看看。

是什么物质我不清楚,因为是在分离真菌代谢物。样品是溶在甲醇里的,甲醇峰不会这么高吧,响应值有30-40呢
4楼2015-06-23 11:04:46
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1030694963

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 七月七月99 at 2015-06-23 10:47:47
像是柱子的问题,柱子的选择性不行,更换另外的柱子试试!

您做分离一般用什么柱子啊,我们只有C18
5楼2015-06-23 11:08:39
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1030694963

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by klicking at 2015-06-23 11:39:51
代谢产物过于复杂,不知道样品有没有经过前处理,如果直接用甲醇溶解进样,估计是难以改善的。建议先从样品前处理下功夫。...

哦,我的样品TLC点板,展开剂用氯仿:甲醇5:1,显示一个点,所以我才打液相看一下纯度如何,没想到峰这么奇怪,是个三角形,而且在两种波长下都是这样,是不是上样量大啦,但是响应值也没有很高啊
7楼2015-06-23 14:16:16
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1030694963

银虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by klicking at 2015-06-23 17:00:02
先走一针空白溶剂试试吧...

好的,谢谢您
9楼2015-06-23 18:34:22
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黎裳333

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
流动相配比不行吧⊙﹏⊙分离度明显不够

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
10楼2015-06-24 10:58:06
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