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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 实验技术 » 高效液相峰出现分叉怎么办
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夏天依旧

金虫 (小有名气)

[求助] 高效液相峰出现分叉怎么办 已有4人参与

本人最近做有机酸提取，用的磷酸盐缓冲液提取叶片、根等组织，水浴、离心后得上清。上机测定时，流动相用的0.05mmol/L磷酸二氢钾，用磷酸调pH至2.5，超滤。测定时流动相流速0.5ml/min,进样量20ul,紫外210nm检测。跑的峰有分叉，如下图。不知道出现了什么，哪位虫友、大神做过类似的帮忙指点迷津、感激不尽。

高效液相峰出现分叉怎么办
图片1.png
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1楼 2014-04-14 15:20:29
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q317476148

铁杆木虫 (著名写手)

喵星人
难道不是因为提取物不纯么？
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2楼2014-04-14 22:49:46
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夏天依旧

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by q317476148 at 2014-04-14 22:49:46
难道不是因为提取物不纯么？

组织里的组分本来就杂，但是用单一标准品测时也有点分叉，是什么原因？
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3楼2014-04-15 12:01:30
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秋天不下雪

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
210nm貌似是比较特殊的，干扰比较重，我对苦杏仁苷纯品在214nm处出峰，也有杂乱情况，有时候提取物比sigma 色谱标品都好
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要想做总有办法，不想做总有理由
4楼2014-04-16 15:26:09
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乘风牧云

木虫 (职业作家)

--

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
让色谱峰出的晚点看会不会分开，分开就是两个成分，如果还分不开就要考虑柱子填料塌陷等问题，用其它化合物试试，如果其它不裂分的话就是你的色谱条件有问题，需要进一步优化，一般有机酸测定我是往里面添加些酸用来扫尾，不知道你为何用缓冲盐而且流速这么小
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乘长风以牧青云
5楼2014-04-17 13:06:27
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aflycat

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

可以换个色谱柱试试，比如直径小点的
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6楼2014-06-13 11:28:46
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congminyuan

新虫 (初入文坛)
我最近也想做有机酸，跟你的液相的条件都差不多，请问你现在做的实验结果怎么样啊？我第一次接触，虚心请教！
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7楼2015-07-14 12:55:23
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duliyu

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

有机酸提取，加点乙酸可以防止拖尾，现象，另外确定不是溶剂配比问题引起的分叉峰现象么？
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守候之戒
8楼2015-08-17 19:06:01
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