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15150681606

银虫 (小有名气)

[求助] western blot 求助!! 已有1人参与

我们要测capase-3活性,买的caspase-3试剂盒自带裂解液。打算直接用自带的裂解液做小鼠心脏匀浆。但剩余的组织匀浆希望做WB,所以我想在匀浆时加PMSF,但是问了商家说不建议我加PMSF。
“对于caspase 3活性检测不建议加入PMSF,使用试剂盒裂解得到的样品可以用于Western检测, 但是对于一些较难裂解得到的蛋白可能不太适用。 ”-他说
但是不加PMSF我觉得很难做出理想的结果,所以感觉很为难!
各位有什么好的建议么?
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15150681606

银虫 (小有名气)

2楼2015-06-12 14:07:41
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绯红誓言

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
15150681606: 金币+8, ★★★很有帮助, 感谢帮助,谢谢交流。 2015-06-23 14:15:33
PMSF 苯甲基磺酰氟 它的靶蛋白酶是胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶,我认为PMSF是可以抑制大部分的蛋白酶,但是对于靶蛋白酶的抑制是最主要的。而capase-3是32kD的半胱氨酸蛋白酶,为了减少PMSF对试验结果的干扰,我建议不要加。
3楼2015-06-16 23:58:49
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