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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » western blot 求助！！
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15150681606

银虫 (小有名气)

[求助] western blot 求助！！已有1人参与

我们要测capase-3活性，买的caspase-3试剂盒自带裂解液。打算直接用自带的裂解液做小鼠心脏匀浆。但剩余的组织匀浆希望做WB，所以我想在匀浆时加PMSF，但是问了商家说不建议我加PMSF。
“对于caspase 3活性检测不建议加入PMSF，使用试剂盒裂解得到的样品可以用于Western检测， 但是对于一些较难裂解得到的蛋白可能不太适用。 ”-他说
但是不加PMSF我觉得很难做出理想的结果，所以感觉很为难！
各位有什么好的建议么？
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1楼2015-06-10 16:22:06
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15150681606

银虫 (小有名气)
2楼2015-06-12 14:07:41
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绯红誓言

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
15150681606: 金币+8, ★★★很有帮助, 感谢帮助，谢谢交流。 2015-06-23 14:15:33
PMSF 苯甲基磺酰氟 它的靶蛋白酶是胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶，我认为PMSF是可以抑制大部分的蛋白酶，但是对于靶蛋白酶的抑制是最主要的。而capase-3是32kD的半胱氨酸蛋白酶，为了减少PMSF对试验结果的干扰，我建议不要加。
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3楼2015-06-16 23:58:49
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