24小时热门版块排行榜    

查看: 5873  |  回复: 5

wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上

[求助] 怎么判断表达的蛋白是胞内的还是胞外的 已有4人参与

各位虫友们,最近将一个外源基因重组转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,诱导表达之后,怎样判断表达的蛋白是胞内的还是胞外的呢?还有怎样判断形成的是包涵体还是可溶性蛋白呢?多这几个概念都很模糊,希望大家指导一下,不胜感激!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

喜欢生物,所以想好好研究下去!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hajierlove

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
菌体破碎,收集上清和包涵体,在上清即可溶性表达

[ 发自小木虫客户端 ]
踏实
2楼2015-06-06 15:01:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上

引用回帖:
2楼: Originally posted by hajierlove at 2015-06-06 15:01:36
菌体破碎,收集上清和包涵体,在上清即可溶性表达

那上清和沉淀都有呢
喜欢生物,所以想好好研究下去!
3楼2015-06-08 08:30:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zoelxx

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by wu-ke-da at 2015-06-08 08:30:51
那上清和沉淀都有呢...

那就是可溶性和包涵体并存呗!
4楼2015-06-08 09:02:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

calorimetry

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
大肠杆菌分泌外源蛋白质经常形成包涵体,其中原因之一是表达的量太多和速度太快,但是组成包涵体的蛋白质已不是一开始就是直接结合到包涵体上,而是首先也是游离的,当然如果形成了包涵体,肯定最大量的目的蛋白质是在包涵体。

至于目的蛋白质是不是外源表达,一般设计密码时没有导肽一般不可能是外源表达的,而且能够分泌到细胞外的话,表达量都比较低,不太可能形成包涵体。
5楼2015-06-08 09:32:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sonyangg

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

提个膜蛋白,跑个WB就知道了吧,不透膜做一下免疫荧光也可以
6楼2015-06-08 15:37:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wu-ke-da 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +9 材料学257求调剂 2026-03-23 10/500 2026-03-24 07:36 by wangy0907
[考研] 284求调剂 +10 Zhao anqi 2026-03-22 10/500 2026-03-24 00:08 by Equinoxhua
[考研] 299求调剂 +5 某某某某位 2026-03-21 5/250 2026-03-23 23:36 by 热情沙漠
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +7 纸鱼ly 2026-03-21 8/400 2026-03-23 23:31 by chixmc
[考研] 085600材料与化工调剂 +7 A-哆啦Z梦 2026-03-23 12/600 2026-03-23 23:16 by 星空星月
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
[考研] 一志愿陕师大生物学071000,298分,求调剂 +3 SYA! 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:09 by macy2011
[考研] 298求调剂 +8 上岸6666@ 2026-03-20 8/400 2026-03-23 11:02 by laoshidan
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 0854电子信息求调剂 +3 α____ 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:28 by zhq0425
[考研] 289材料与化工(085600)B区求调剂 +3 这么名字咋样 2026-03-22 4/200 2026-03-22 17:56 by 云民大李老师
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +5 vv迷 2026-03-21 8/400 2026-03-22 14:20 by ColorlessPI
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 311求调剂 +3 勇敢的小吴 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:40 by ColorlessPI
[考研] 一志愿西南交大,求调剂 +5 材化逐梦人 2026-03-18 5/250 2026-03-21 00:26 by JourneyLucky
[考研] 南京大学化学376求调剂 +3 hisfailed 2026-03-19 6/300 2026-03-20 23:43 by hisfailed
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 本科郑州大学物理学院,一志愿华科070200学硕,346求调剂 +4 我不是一根葱 2026-03-18 4/200 2026-03-19 09:11 by 浮云166
[考研] 0703化学调剂 +3 妮妮ninicgb 2026-03-17 3/150 2026-03-18 10:29 by macy2011
信息提示
请填处理意见