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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 请问各位大侠有知道怎么通过酶学性质分析来判断某一个酶在胞内还是胞外呢，谢啦！！
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北楼微生物

金虫 (小有名气)

[求助] 请问各位大侠有知道怎么通过酶学性质分析来判断某一个酶在胞内还是胞外呢，谢啦！！

现在要表达一个酶，想知道在胞内还是胞外，具体该怎么操作啊。求指导啊
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1楼 2013-04-11 20:47:35
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shiliu2011

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
laozuzunzhe: 金币+3, good! 2013-04-12 21:27:37
我想可以分别用细菌沉淀和上清跑s d s ,看目的带在哪里，在沉淀就是胞内，在上清就是胞外

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2013-04-12 02:32:33
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戴晓凤

铜虫 (初入文坛)

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★ ★ ★
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zhang8826857: 金币+3, 鼓励新虫 2013-04-13 22:20:10
用上清和菌液分别测活性不行吗
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每天进步一点
4楼2013-04-12 10:14:05
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戴晓凤

铜虫 (初入文坛)

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★ ★ ★
zhang8826857: 金币+3, 鼓励新虫 2013-04-13 22:20:16
我觉得SDS不行吧，因为它的区分度在于分子大小，你要特异性的探究这种酶是否存在，还是离心分别去上清和菌液，用底物进行酶学活性检测，这样专一性强啊，有说服力
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每天进步一点
5楼2013-04-12 10:18:15
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tiu007

银虫 (小有名气)

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★
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zhang8826857: 金币+1, 鼓励回帖 2013-04-13 22:20:25
大家好像没有注意，如果不是同步培养的话，部分细菌自溶后，若是胞内酶，胞质内的酶释放出来，用大家的方法不就假阳性了。
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6楼2013-04-12 15:16:56
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tiu007

银虫 (小有名气)

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★ ★ ★ ★ ★
北楼微生物: 金币+5 2013-04-13 10:21:51
我觉得还是从酶的性质入手，看他能不能从细胞各种膜透过考虑!
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7楼2013-04-12 15:18:51
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shiliu2011

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我想可以分别用细菌沉淀和上清跑s d s ,看目的带在哪里，在沉淀就是胞内，在上清就是胞外

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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鎴戜滑鎬绘槸澶繃浜庡湪涔庝竴鏃剁殑寰楀け锛屽?村繕璁颁簡鎴?闀挎�?鏄渶閲?瑕?鐨�
3楼2013-04-12 02:33:19
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北楼微生物

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by shiliu2011 at 2013-04-12 02:32:33
我想可以分别用细菌沉淀和上清跑s d s ,看目的带在哪里，在沉淀就是胞内，在上清就是胞外

我弱弱的表示这个好像只能说明目的蛋白的表达形式吧！！！
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8楼2013-04-13 10:17:52
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北楼微生物

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 戴晓凤 at 2013-04-12 10:14:05
用上清和菌液分别测活性不行吗

应该可以试试的，谢谢！！！！
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9楼2013-04-13 10:18:47
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北楼微生物

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by tiu007 at 2013-04-12 15:16:56
大家好像没有注意，如果不是同步培养的话，部分细菌自溶后，若是胞内酶，胞质内的酶释放出来，用大家的方法不就假阳性了。

同步培养？？？？那具体用啥方法合适呢！！！？？？？
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10楼2013-04-13 10:20:05
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