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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请问怎么判断一个酶是单亚基蛋白还是双亚基蛋白？
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well_想太多

新虫 (小有名气)

[求助] 请问怎么判断一个酶是单亚基蛋白还是双亚基蛋白？ 已有1人参与

看文献时看到这么一句话，说通过SDS-PAGE测定纯酶的分子量为41.6kD，表明该酶为单亚基蛋白，但是我不明白是怎么判断出来的，还请前辈指教？目前我根据我的目的基因片段的大小知道蛋白的氨基酸数量，也预测了蛋白的分子量大约是73kD,怎么判断呢？
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1楼 2015-03-03 16:53:17
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ptttmt

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-03-10 10:40:05
文献里应该也讲到了分子筛测定的酶的分子量吧？假如一个酶不知道是几聚体，但分子筛测出是40，而用SDS-PAGE测出是20，那这个酶就是二聚体；如果分子筛和SDS-PAGE测出来都是20，那这个酶就是单体

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2楼2015-03-04 01:09:26
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well_想太多

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ptttmt at 2015-03-04 01:09:26
文献里应该也讲到了分子筛测定的酶的分子量吧？假如一个酶不知道是几聚体，但分子筛测出是40，而用SDS-PAGE测出是20，那这个酶就是二聚体；如果分子筛和SDS-PAGE测出来都是20，那这个酶就是单体
...

那是不是我要跑一下sds-page才能判断？
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3楼2015-03-04 14:21:03
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ptttmt

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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3楼: Originally posted by well_想太多 at 2015-03-04 14:21:03
那是不是我要跑一下sds-page才能判断？...

这对于确定单体与否是很有必要的

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4楼2015-03-04 15:04:25
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well_想太多

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ptttmt at 2015-03-04 15:04:25
这对于确定单体与否是很有必要的
...

还有一个问题请问一下，我是利用软件计算的蛋白分子量，可是与其他人给的算法算出的分子量不一样，我看有的是利用核苷酸大小/3*110得到的，请问是因为软件计算的是两条链的分子量大小吗？
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5楼2015-03-04 15:16:02
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ptttmt

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-03-10 10:40:12
引用回帖:
5楼: Originally posted by well_想太多 at 2015-03-04 15:16:02
还有一个问题请问一下，我是利用软件计算的蛋白分子量，可是与其他人给的算法算出的分子量不一样，我看有的是利用核苷酸大小/3*110得到的，请问是因为软件计算的是两条链的分子量大小吗？...

你是 啥软件计算的？你说的2条链啥意思，是2个亚基还是2条DNA链？
一般 知道核苷酸序列，翻译出蛋白氨基酸序列，随便用个软件都能算出准确的理论分子量，除3乘110只是大概算分子量

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6楼2015-03-04 15:36:28
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well_想太多

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ptttmt at 2015-03-04 15:36:28
你是 啥软件计算的？你说的2条链啥意思，是2个亚基还是2条DNA链？
一般 知道核苷酸序列，翻译出蛋白氨基酸序列，随便用个软件都能算出准确的理论分子量，除3乘110只是大概算分子量
...

我用的是expasy的网页上算的等电点和分子量，请问你是用dnaman算的准确分子量吗？能告诉怎么算的吗？
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7楼2015-03-04 19:50:35
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ptttmt

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
well_想太多: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-03-09 09:58:55
引用回帖:
7楼: Originally posted by well_想太多 at 2015-03-04 19:50:35
我用的是expasy的网页上算的等电点和分子量，请问你是用dnaman算的准确分子量吗？能告诉怎么算的吗？...

懒得回答了，一个金币都没有

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8楼2015-03-05 19:50:50
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well_想太多

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by ptttmt at 2015-03-05 19:50:50
懒得回答了，一个金币都没有
...

不好意思忘记了
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9楼2015-03-09 09:59:07
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