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新虫 (初入文坛)

[求助] BAEE做底物测定酶活怎么计算

各位大神 我现在要测定木瓜蛋白酶酶活,文献上是用1.5mL BAEE做底物,0.5mL DTT激活剂,加上1毫升酶液,在3min 钟内测定吸光值。现在由于我对酶进行了某手段的包埋变成不溶性颗粒,我在测酶活的时候对文献的方法进行了改良 :3mL 底物,1ML激活剂,然后把2mg 包埋的酶加入到2mL PBS中(相当于把它视为2mL 均匀的酶液)然后反应五分钟,测定吸光度的值,我想问在计算酶活的时候应该如何计算啊,在图中的公式里没有把反应总体积计算,那么要把反应液的总体积(6mL)计算入内吗??跪求大神们帮帮忙啊!!!还有图中的公式第二条是不对的吧,分母怎么有要除以酶液体积呢?另外我还参考了下面网址的计算方法,求大神给个标准吧!!http://www.sigmaaldrich.com/china-mainland/zh/technical-documents/protocols/biology/enzymatic-assay-of-trypsin.html

BAEE做底物测定酶活怎么计算
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