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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 关于提取DNA的纯化问题
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爱未眠725

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于提取DNA的纯化问题 已有1人参与

鄙人再提取测序用植物线粒体，测序要求纯度高，且提取的DNA无降解。但前几次提取出来均不能达到要求，我有个想法，用提取质粒试剂盒所用的HiBind吸附柱做纯化，已知道该种吸附柱能结合的片段大小为65bp~10kb，孔径大小为0.7~1微米。因此，我想问500kb~700kb左右的基因组DNA能不能通过这么大小的孔径？如果不能通过，大概多大的孔径才可以？如果能通过，那以这种方法吸附掉小片段的DNA，是不是能达到纯化掉降解的DNA？
       新人第一次提问，恳请各位大神不吝赐教，如能提供相关帮助与建议，鄙人不胜感激！
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1楼 2015-05-19 20:27:32
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itEcor

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-05-20 10:13:40
得先看看是不是以基因组大小进行区别吸附，DNA应该是不那么容易降解的啊

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2楼2015-05-20 01:05:24
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爱未眠725

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by itEcor at 2015-05-20 01:05:24
得先看看是不是以基因组大小进行区别吸附，DNA应该是不那么容易降解的啊

这种吸附住是提取质粒的试剂盒里的。其原理是根据盐浓度和pH的大小不同进行吸附与洗脱。

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3楼2015-05-20 09:33:58
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itEcor

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 爱未眠725 at 2015-05-20 09:33:58
这种吸附住是提取质粒的试剂盒里的。其原理是根据盐浓度和pH的大小不同进行吸附与洗脱。
...

是啊，也没说是否跟基因组大小有关，这个不好说，不过你可以先试试啊

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4楼2015-05-20 10:22:39
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