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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC测样过程中柱压一直升高
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小米粒儿琳

新虫 (小有名气)

[求助] HPLC测样过程中柱压一直升高 已有9人参与

最近在做药物体外释放度的实验，接收介质为30%PEG-PBS溶液，流动相水和乙腈比例为65:35，样品每次都有进过过滤，每次批量进样后柱压就升高很多，该怎么处理呢亲们？
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1楼 2015-05-13 13:51:32
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你是单纯的压力升高还是同时保留时间也变了？有可能PEG逐渐积累。这样的话需要在样品前处理上下功夫。可能需要过个SPE之类的。

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4楼2015-05-13 15:23:26
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gh309

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
稀释样本，，有可能不纯。。。。。。
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12楼2015-05-14 16:41:21
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lxp_tjuer

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

本科生一枚，太深入的不懂，前一段时间做毕设给peg接上叶酸，用hplc分析纯度时，流动相是pbs:甲醇9:1，柱子也是c18，产物偶尔出峰完全不具备重现性。最后我把流动相调整成甲醇：四氢呋喃：醋酸铵缓冲液（0.17m）94:5：1后，产物出峰正常，楼主可以用点thf试试哦

[ 发自小木虫客户端 ]
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20楼2015-05-16 07:32:24
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普通回帖

123-

银虫 (小有名气)
样品上样前，多过滤几次（0.22um滤膜)，测定结束后，冲柱子时间长一些，适当提高水比例充柱，使用预柱，这几个方法都用上吧，应该会好一点
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2楼2015-05-13 14:01:45
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匿名

用户注销 (知名作家)

精修问题可私信
感谢参与，应助指数 +1
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3楼2015-05-13 14:31:19
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Greifvogel

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
C18柱子吗？PEG吸附在固定相上了。
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MeineEhreheisstTreue
5楼2015-05-13 16:20:14
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shiyang1004

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有可能是pbs析出了，能不能降低缓冲盐浓度，或者做一下净化除去缓冲盐。
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6楼2015-05-14 08:28:50
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xy201209

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
将配好样品溶液用流动相稀释看是否会浑浊，如果变浑浊，尽管进样前是澄清的，进样后也很可能析出，堵塞管路系统。造成柱压升高。
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7楼2015-05-14 09:18:50
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小米粒儿琳

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by superyeast at 2015-05-13 15:23:26
你是单纯的压力升高还是同时保留时间也变了？有可能PEG逐渐积累。这样的话需要在样品前处理上下功夫。可能需要过个SPE之类的。

确实是保留时间也跟着变了,您能给具体说下SPE是什么么。。。之前还真是没听说过这个，还有，如果PEG逐渐积累，有什么办法能把它洗脱下来么
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8楼2015-05-14 15:45:07
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小米粒儿琳

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by Greifvogel at 2015-05-13 16:20:14
C18柱子吗？PEG吸附在固定相上了。

确实是C18的柱子，想问下PEG吸附在固定相上有什么较好的洗脱办法么，或者样品前处理办法呢
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9楼2015-05-14 15:47:01
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倔强的柠檬片

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
色谱柱是什么样的
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10楼2015-05-14 16:19:56
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