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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC测样过程中柱压一直升高
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Greifvogel

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by 小米粒儿琳 at 2015-05-14 15:47:01
确实是C18的柱子，想问下PEG吸附在固定相上有什么较好的洗脱办法么，或者样品前处理办法呢...

别接检测器，柱温箱控温45度用100%乙醇冲吧。
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MeineEhreheisstTreue
11楼2015-05-14 16:40:33
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gh309

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
稀释样本，，有可能不纯。。。。。。
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12楼2015-05-14 16:41:21
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小米粒儿琳

新虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by Greifvogel at 2015-05-14 16:40:33
别接检测器，柱温箱控温45度用100%乙醇冲吧。...

没有色谱级的乙醇啊……甲醇行不行啊亲

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13楼2015-05-14 16:46:25
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Greifvogel

木虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 小米粒儿琳 at 2015-05-14 16:46:25
没有色谱级的乙醇啊……甲醇行不行啊亲
...

随意试吧
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MeineEhreheisstTreue
14楼2015-05-14 17:20:41
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小米粒儿琳

新虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by Greifvogel at 2015-05-14 17:20:41
随意试吧...

随意……

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15楼2015-05-14 21:01:20
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 小米粒儿琳 at 2015-05-13 23:45:07
确实是保留时间也跟着变了,您能给具体说下SPE是什么么。。。之前还真是没听说过这个，还有，如果PEG逐渐积累，有什么办法能把它洗脱下来么...

PEG很难完全洗脱，经常会造成重复性差，分离度变化等等。你可以试试用强溶剂（ACN，THF，IPA）尽量高温（在柱子允许范围之内）冲洗。

SPE又叫固相萃取，是分析里常用的预处理方式。你百度一下会出很多。你可以找找有没有针对PEG的方法。

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16楼2015-05-15 15:26:23
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irvine2015

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主的问题我也遇到了，泵里面有一个滤芯，流动相必经这个滤芯才能通过管路进柱子，很有可能这个滤芯脏了（过滤头坏了，必然导致滤芯被污染），所以压力慢升。另外也有人说可能是管路某处堵了，就像人得血栓一样，血压升高。前者可能性大，可以乙腈或甲醇清洗一下，如果太脏就直接换新的吧
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广州是我的风水宝地！
17楼2015-05-16 05:48:36
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lxp_tjuer

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by Greifvogel at 2015-05-13 16:20:14
C18柱子吗？PEG吸附在固定相上了。

真的吗

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18楼2015-05-16 07:25:47
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lxp_tjuer

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
18楼: Originally posted by lxp_tjuer at 2015-05-16 07:25:47
真的吗
...

本科生一枚，太深入的不懂，前一段时间做毕设给peg接上叶酸，用hplc分析纯度时，流动相是pbs:甲醇9:1，柱子也是c18，产物偶尔出峰完全不具备重现性。最后我把流动相调整成甲醇：四氢呋喃：醋酸铵缓冲液（0.17m）94:5：1后，产物出峰正常，楼主可以用点thf试试哦

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19楼2015-05-16 07:31:49
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lxp_tjuer

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

本科生一枚，太深入的不懂，前一段时间做毕设给peg接上叶酸，用hplc分析纯度时，流动相是pbs:甲醇9:1，柱子也是c18，产物偶尔出峰完全不具备重现性。最后我把流动相调整成甲醇：四氢呋喃：醋酸铵缓冲液（0.17m）94:5：1后，产物出峰正常，楼主可以用点thf试试哦

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20楼2015-05-16 07:32:24
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