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小米粒儿琳

新虫 (小有名气)

[求助] HPLC测样过程中柱压一直升高 已有9人参与

最近在做药物体外释放度的实验,接收介质为30%PEG-PBS溶液,流动相水和乙腈比例为65:35,样品每次都有进过过滤,每次批量进样后柱压就升高很多,该怎么处理呢亲们?
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lxp_tjuer

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

本科生一枚,太深入的不懂,前一段时间做毕设给peg接上叶酸,用hplc分析纯度时,流动相是pbs:甲醇9:1,柱子也是c18,产物偶尔出峰完全不具备重现性。最后我把流动相调整成甲醇:四氢呋喃:醋酸铵缓冲液(0.17m)94:5:1后,产物出峰正常,楼主可以用点thf试试哦

[ 发自小木虫客户端 ]
20楼2015-05-16 07:32:24
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查看全部 22 个回答

123-

银虫 (小有名气)

样品上样前,多过滤几次(0.22um滤膜),测定结束后,冲柱子时间长一些,适当提高水比例充柱,使用预柱,这几个方法都用上吧,应该会好一点
2楼2015-05-13 14:01:45
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匿名

用户注销 (知名作家)

精修问题可私信


感谢参与,应助指数 +1
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3楼2015-05-13 14:31:19
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你是单纯的压力升高还是同时保留时间也变了?有可能PEG逐渐积累。这样的话需要在样品前处理上下功夫。可能需要过个SPE之类的。

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2015-05-13 15:23:26
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