24小时热门版块排行榜    

查看: 5199  |  回复: 22
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

依然自然

新虫 (小有名气)

[求助] RNA提取时,浓度4252.2,A260/280=1.99,但电泳跑不出RNA,原因是? 已有10人参与

我在提取RNA时,取样0.1g,新鲜样品现磨,用的Trizol提取法。结果RNA的浓度可以,2.0>A260/280>1.8,A260/230>2.0。但跑胶时没有RNA出现,只有点样孔很亮,和DNA Marker条带(图1)。跑胶时采用点样体系:DNA Loading Buffer、DNA Marker、Gel stain(核酸染料)各2ul,上样量2ul。跑胶条件:U=100V、I 随意,时间12min。出现问题之后,我采用大电泳槽电泳,电泳条件为:U=220V、I 随意、时间15min。结果是RNA拖尾,DNA Marker更清楚(图2)。请问这种问题可能是由于什么原因造成的?谁有好主意接下来我该做些什么测试才能找出问题和解决问题?谢谢!

RNA提取时,浓度4252.2,A260/280=1.99,但电泳跑不出RNA,原因是?
图1.jpg


RNA提取时,浓度4252.2,A260/280=1.99,但电泳跑不出RNA,原因是?-1
图2.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

生命就如旅行。。。。所以要一直笑着
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

依然自然

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2015-05-13 15:43:17
加样孔很亮,应该是你的RNA中有杂蛋白污染。

我提取的植物是一种多酚多糖的,听我师姐的意思是RNA被一种蛋白或者糖类包裹着,跑不出来,但她也不知道如何改进。请问如何有效的改进我的实验?  谢谢了!
生命就如旅行。。。。所以要一直笑着
3楼2015-05-13 18:22:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 23 个回答

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
依然自然(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-15 19:33:49
加样孔很亮,应该是你的RNA中有杂蛋白污染。
2楼2015-05-13 15:43:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
都没提出来,测OD有什么用

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2015-05-13 18:28:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 依然自然 at 2015-05-13 18:22:19
我提取的植物是一种多酚多糖的,听我师姐的意思是RNA被一种蛋白或者糖类包裹着,跑不出来,但她也不知道如何改进。请问如何有效的改进我的实验?  谢谢了!...

试试氯化锂沉淀法,文献中也有很多改良氯化锂法提多酚多糖植物RNA的操作步骤,或是买专用于提取多酚多糖植物RNA的试剂盒。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

5楼2015-05-13 19:25:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +4 349506619 2026-08-28 4/200 2026-08-29 22:41 by alongwaytogo
[基金申请] 国社科申报系统有变化 +3 kynobel 2026-08-23 3/150 2026-08-29 21:57 by 余韵清
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 3/150 2026-08-29 21:35 by 4qO8zhfjr2AX
[博后之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-29 21:33 by 4qO8zhfjr2AX
[基金申请] 面上意见出来了 +8 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 16/800 2026-08-29 20:45 by 黄鸟于飞Chao
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 3/150 2026-08-29 18:26 by 4FFAWE8HcgUD
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +5 德尚中行 2026-08-27 6/300 2026-08-29 18:10 by manplx
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +4 tannykie 2026-08-29 4/200 2026-08-29 17:14 by lmz0216
[找工作] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-29 11:51 by jCd0dEvKHShX
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-29 11:40 by jCd0dEvKHShX
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 9/450 2026-08-29 09:59 by jklily
[基金申请] 基金不中,共勉 +11 eulota 2026-08-26 11/550 2026-08-28 14:22 by 火星超人xi
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
信息提示
请填处理意见