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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 大神帮我看看这样的RNA是不是能用来荧光定量？
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luyo_wait

金虫 (初入文坛)

[求助] 大神帮我看看这样的RNA是不是能用来荧光定量？ 已有2人参与

请问：左边的8条泳道为根，右边的8条为叶片，是不是右边的叶片已经降解了？这种结果还能不能用来qRT-PCR？什么只有叶片降解了，而根没有降解？

操作过程中几个可能有问题的地方：

1.提取完成后用全式金的RNA溶解液溶解后我在常温下（20℃）放置了一个小时，不会这段时间分解了吧？
2.跑胶的时候用了1.5%的琼脂糖，但配置1xTAE的时候我是拿实验室纯水直接配置的，不会是这个过程产生的影响？
3.叶中提取出的RNA量要明显多于根，是不是多了反而跑不开？
3.顺便请教下提取好的RNA（用溶解液溶解后）如何保存最好？大概一周后要用。

大神帮我看看这样的RNA是不是能用来荧光定量？
NML2015-05-06 22 时 14 分.jpg
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1楼 2015-05-08 10:36:08
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-05-08 13:10:51
多了没事，要反转录的吗？放负80度。
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采菊东篱下，悠然见南山。
3楼2015-05-08 11:03:50
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小小逍遥人

金虫 (正式写手)

张斌猪
可以Qpcr定量，直接放-20即可
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生命还需要奇迹来衬托
2楼2015-05-08 10:57:37
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-05-08 13:11:00
luyo_wait: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-05-12 09:15:21
叶片降解。RNA溶解后，室温放置易降解，最好放到冰上。长期保存要超低温。原则上这个过程，包括电泳，都是需要用RNase-free，但一般电泳液，只要换新就好，电泳时间尽量短，电压尽量低（110 V-130 V，7-10 min就好）。浓度和质量的量化，可以用仪器测定（分光光度计或Nanodrop）。
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4楼2015-05-08 11:21:10
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