应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物信息 » DNA序列比对
81/1返回列表
查看: 1139  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

路尽繁华

铜虫 (小有名气)

[求助] DNA序列比对 已有6人参与

现有一已知基因序列（500多bp），筛选出阳性克隆测序，通过DNAman比对，有5~15个碱基与已知序列不相同，被嫌弃了，基因是对的，但是被怀疑有碱基突变，不晓得能否进行下一步实验。用的廉价酶，生工测序，被各种吐槽如：用的酶不行（易突变）、国内测序不行，求大神分享哈经验
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-05-08 00:06:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bright8

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 鼓励发帖积极交流。 2015-05-08 13:08:34
用takara普通taq酶,1000bp也只有2到3个突变,你这突变太多，建议换高保真酶。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2015-05-08 07:33:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yingheqian

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-05-08 13:08:44
如果只是做长度多态，用普通酶，如果要测序，要克隆表达，一定要用高保真酶
赞一下 回复此楼
3楼2015-05-08 07:50:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-05-08 13:08:52
才500BP,不太容易突变的，，应该是你模板本身就是如此。我做8000BP用的TAKALA的普通的酶，测序后也没一个突变的，即使突变了，看下氨基酸的情况，对的话也没问题。还可以用重叠PCR把你突变的碱基变回来。
赞一下 回复此楼
采菊东篱下，悠然见南山。
4楼2015-05-08 11:21:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ZQS2013

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-08 22:25:30
500bp能突变5--15个碱基  估计模板有问题的可能性大些   原来做克隆遇到过一段序列的突变  找了下原因是引物有问题   建议检查下模板和引物吧   突变这么多  氨基酸应该也变化   不可用了  重新做吧
赞一下 回复此楼
5楼2015-05-08 11:50:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

向光生长

禁虫 (知名作家)
★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-05-08 13:09:00
本帖内容被屏蔽
6楼2015-05-08 12:10:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanglele87

金虫 (著名写手)
是同意突变就没事。酶的话还是用高保真pfu吧。测序的话还有在国外测的。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
一生不羁放纵爱自由
7楼2015-05-08 12:54:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王冠傑

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
把峰图贴出来，有问题的地方圈出来，我看看是不是测序问题。
赞一下 回复此楼
8楼2015-05-10 15:02:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 路尽繁华 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭