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木酮糖激酶活性测定问题
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大家好，我是做木糖酿酒酵母育种的。目前的试验是测定重组菌株的木酮糖激酶的酶活。按照文献配制了协同反应物。做标曲的时候遇到问题。 ATP、PEP、NADH 是用pH7.0的Tris-HCl 溶解的，分装保存于-80℃，PK、LDH同样用pH7.0的Tris-HCl 溶解，保存于-20℃。已经做了一周的标曲了。 出现两个问题，1. 对NADH做时间扫描，不稳定。2. 同一浓度在数据稳定情况下，数据不一致，重复性差。 请各位大神不吝赐教。  000.png  |
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