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查看: 2016  |  回复: 6

yliu_0101

银虫 (小有名气)

[求助] 受体酪氨酸激酶抑制剂活性筛选

我自己合成了一系列的受体酪氨酸激酶抑制剂化合物,现在拿来测活性!但由于化合物的极性不同,有些在水中好溶,有些在水中极难溶。难溶的我先用DMSO溶解,后用水稀释,但还是析出来了,没有完全溶解,很郁闷!在不影响活性测试的情况下,除水外还有没有其他溶剂溶解(如乙醇,我的化合物在醇中很好溶解)?  还不知道DMSO的溶度应控制到多少一下,才不影响酶测试活性。  现已买了invitrogen公司的抗体标记酪氨酸激酶试剂盒(型号A-35725),这个试剂盒的说明书说的不详细。望高人指点啊!俺在此谢啦!
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fighting
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marktiger

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
试试成盐能不能好一点?
marktigerchen
2楼2012-11-21 08:03:33
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yliu_0101

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by marktiger at 2012-11-21 08:03:33
试试成盐能不能好一点?

嗯,我以前做成盐酸盐的,但都没成上。现在样品也不多了!
fighting
3楼2012-11-21 13:44:04
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yliu_0101

银虫 (小有名气)

自己顶一个!有用过invitrogen公司的抗体标记酪氨酸激酶试剂盒的吗?大伙帮帮俺啊!
fighting
4楼2012-11-21 13:46:34
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tianchao7133

金虫 (正式写手)

药剂小兵


【答案】应助回帖


痴夷子皮: 金币+1, 谢谢交流,欢迎常来哦。 2013-01-14 08:29:00
可以用乙醇(10%以下),DMSO(1%以下)作为溶剂
5楼2013-01-13 11:06:33
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PSA

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
痴夷子皮: 金币+2, 谢谢交流,欢迎常来哦。 2013-01-14 08:29:14
1.如果你的化合物溶解度极差,就算它体外酶活性好,那么成药可能性可能不是很大哦!
2. DMSO的用量一般在5%以内(最大限度),你在测试时,要有个溶剂对照,除了空白外!
3. protocol不详细的话,你可以尝试联系一下invitrogen公司的supporter。
祝好运!
6楼2013-01-13 12:40:39
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kendon

木虫 (小有名气)

★ ★
痴夷子皮: 金币+2, 谢谢交流,欢迎常来哦。 2013-03-04 15:07:05
化合物不溶解跟试剂盒没有关系,其实对于这类酶活的测定方法,最好是控制DMSO浓度前提下,尽可能减少稀释步骤(化合物不溶就怕稀释步骤过多,药物有损耗),毕竟激酶生化水平的结果仅是一个初步结果,先看看是否有抑制作用,最理想的方式就是用robot,这样可以一次加入配置化合物(避免过多的稀释),又能保证药效,一点愚见,仅供参考。
7楼2013-03-04 13:47:23
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