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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 临床研究 » 受体酪氨酸激酶抑制剂活性筛选
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yliu_0101

银虫 (小有名气)

[求助] 受体酪氨酸激酶抑制剂活性筛选

我自己合成了一系列的受体酪氨酸激酶抑制剂化合物，现在拿来测活性！但由于化合物的极性不同，有些在水中好溶，有些在水中极难溶。难溶的我先用DMSO溶解，后用水稀释，但还是析出来了，没有完全溶解，很郁闷！在不影响活性测试的情况下，除水外还有没有其他溶剂溶解（如乙醇，我的化合物在醇中很好溶解）？  还不知道DMSO的溶度应控制到多少一下，才不影响酶测试活性。  现已买了invitrogen公司的抗体标记酪氨酸激酶试剂盒（型号A-35725），这个试剂盒的说明书说的不详细。望高人指点啊！俺在此谢啦！
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fighting
1楼 2012-11-20 23:12:20
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marktiger

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
试试成盐能不能好一点？
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marktigerchen
2楼2012-11-21 08:03:33
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yliu_0101

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by marktiger at 2012-11-21 08:03:33
试试成盐能不能好一点？

嗯，我以前做成盐酸盐的，但都没成上。现在样品也不多了！
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fighting
3楼2012-11-21 13:44:04
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yliu_0101

银虫 (小有名气)
自己顶一个！有用过invitrogen公司的抗体标记酪氨酸激酶试剂盒的吗？大伙帮帮俺啊！
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fighting
4楼2012-11-21 13:46:34
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tianchao7133

金虫 (正式写手)

药剂小兵

【答案】应助回帖

★
痴夷子皮: 金币+1, 谢谢交流，欢迎常来哦。 2013-01-14 08:29:00
可以用乙醇（10%以下），DMSO（1%以下）作为溶剂
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5楼2013-01-13 11:06:33
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PSA

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
痴夷子皮: 金币+2, 谢谢交流，欢迎常来哦。 2013-01-14 08:29:14
1.如果你的化合物溶解度极差，就算它体外酶活性好，那么成药可能性可能不是很大哦！
2. DMSO的用量一般在5%以内（最大限度），你在测试时，要有个溶剂对照，除了空白外！
3. protocol不详细的话，你可以尝试联系一下invitrogen公司的supporter。
祝好运！
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6楼2013-01-13 12:40:39
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kendon

木虫 (小有名气)
★ ★
痴夷子皮: 金币+2, 谢谢交流，欢迎常来哦。 2013-03-04 15:07:05
化合物不溶解跟试剂盒没有关系，其实对于这类酶活的测定方法，最好是控制DMSO浓度前提下，尽可能减少稀释步骤（化合物不溶就怕稀释步骤过多，药物有损耗），毕竟激酶生化水平的结果仅是一个初步结果，先看看是否有抑制作用，最理想的方式就是用robot，这样可以一次加入配置化合物（避免过多的稀释），又能保证药效，一点愚见，仅供参考。
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7楼2013-03-04 13:47:23
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