24小时热门版块排行榜    

查看: 3163  |  回复: 18

含笑天天

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助】纳豆激酶活性测定 已有9人参与

各位高手大家好,我检测纳豆激酶活性是用纤维蛋白平办法:
    10 ml纤维蛋白原溶液(1.2 mg/ml 纤维蛋白原,50 mM 巴比妥钠,90 mM NaCl,1.7 mM CaCl2,0.7 mM MgCl2,pH 7.75),10 ml 琼脂糖溶液(0.8%),分别在55°C水浴中温浴,向琼脂糖溶液中加入1 BP凝血酶溶液(溶在10μl巴比妥钠)。纤维蛋白原溶液和琼脂糖溶液在100 mm平皿中混合于室温放置1 h形成纤维蛋白块,打孔,点样10 μl酶液,37温浴18 h,以尿激酶(100、 80、 60、 40、 20 U/ml)为标准制作标准曲线,计算纳豆激酶的酶活。
     问题出现在尿激酶标准曲线的制作上,上次做直接点尿激酶都没有溶解圈。后来发现尿激酶通过作用于纤维蛋白溶酶原从而发挥作用,为什么我看到的文献上,在做纤维蛋白平板的时候都没提到纤维蛋白溶酶原溶液那??不知道大家做的时候纤维蛋白溶酶原是什么时候加的?请高手赐教
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

生工检测理论与实务

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

虫虫虫虫
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

dongchao

新虫 (小有名气)

纳豆激酶的测定

含笑天天(金币+2): 2010-03-27 14:14
含笑天天(金币+2): 2010-03-27 14:15
不用纤维蛋白溶酶原,主要是因为纤维蛋白和凝血酶加入的技巧,形成的板子要是乳白色,里面是纤维蛋白浑浊,不是透明的,要多操作几次.我已经搞了4年了,希望多交流
3楼2010-03-26 09:32:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

leewolf

金虫 (小有名气)

我也准备正准备坐这个呢,我看的很多文献和你说的这个方法是差不多的,都是参考一篇1952的文献(作者:Astrup T)的,但是没下载到原文。这个问题也是我困惑的,希望高手指点。。。
2楼2010-03-25 23:52:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

leewolf

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by dongchao at 2010-03-26 09:32:24:
不用纤维蛋白溶酶原,主要是因为纤维蛋白和凝血酶加入的技巧,形成的板子要是乳白色,里面是纤维蛋白浑浊,不是透明的,要多操作几次.我已经搞了4年了,希望多交流

能不能给总结下这些技巧,十分感谢
4楼2010-03-26 12:33:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

含笑天天

银虫 (正式写手)

急需技巧

引用回帖:
Originally posted by dongchao at 2010-03-26 09:32:24:
不用纤维蛋白溶酶原,主要是因为纤维蛋白和凝血酶加入的技巧,形成的板子要是乳白色,里面是纤维蛋白浑浊,不是透明的,要多操作几次.我已经搞了4年了,希望多交流

我知道这个,按照您说的意思是,尿激酶能够直接作用于纤维蛋白?我用纤维蛋白溶解法检测发现尿激酶也没有溶解纤维蛋白的活性啊,而且我直接用购买的纤维蛋白做平板,也没有溶解圈,按你说的,尿激酶应该可以直接溶解纤维蛋白??请详细解释说明下??非常感谢
虫虫虫虫
5楼2010-03-27 14:18:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ajsun

木虫 (小有名气)

你可以调整一下尿激酶用量,我觉得是用量太小了。
6楼2010-05-19 12:59:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lanlan1988

铜虫 (初入文坛)

请帮我解决问题

我目前要写有关-端粒和端粒酶的简介的论文 谁能帮我不
7楼2010-05-20 16:46:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

751888275

新虫 (初入文坛)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
我也要做呢 交流一下下吧!
8楼2012-02-24 13:13:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhenxi15

银虫 (小有名气)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
楼主,我周围有人在做这个活性测定,但标准品用的是蚓激酶,不是尿激酶
9楼2012-02-29 10:58:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhenxi15

银虫 (小有名气)

★ ★
树树8013: 金币+2, 08年的虫友,欢迎常来交流。 2012-04-27 21:24:11
尿激酶好像不能直接溶解纤维蛋白
10楼2012-02-29 10:59:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 含笑天天 的主题更新
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 4/200 2026-11-10 12:30 by C6CRn66RYYXS
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 4/200 2026-11-10 12:19 by C6CRn66RYYXS
[考研] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 4/200 2026-11-10 11:46 by YHiw1gou1Eda
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 4/200 2026-11-10 11:35 by YHiw1gou1Eda
[教师之家] 延安大学回应“副教授留绝笔信”:确已离世,正核实举报内容 +4 yexuqing 2026-11-04 6/300 2026-11-10 11:13 by susizheng
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 4/200 2026-11-10 10:18 by YHiw1gou1Eda
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 5/250 2026-11-10 09:23 by 1yv6QACPoY1E
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 3/150 2026-11-10 01:40 by FChKX8meu1ds
[考博] 27博士申请 +3 白白白ly 2026-11-09 3/150 2026-11-09 21:39 by szq0819
[文学芳草园] 厉娜 +3 张丹枫1991 2026-11-09 5/250 2026-11-09 16:53 by 张丹枫1991
[考研] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 15/750 2026-11-09 13:19 by Equinoxhua
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 14/700 2026-11-09 11:52 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 16/800 2026-11-09 11:47 by GwrQVVR6Oenx
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 15/750 2026-11-09 11:41 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 10/500 2026-11-09 08:00 by IhnEQauGmT3K
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 12/600 2026-11-09 06:32 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-09 00:14 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:12 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 02:04 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
信息提示
请填处理意见