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[交流]
【求助】求助ACE抑制活性的测定方法 已有7人参与
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| 各位有没有做过ACE抑制活性的体外测定的，即ACE与HHL反应生成马尿酸的分光光度法测定。本人实验几次结果均不理想，现求助具体测定方法内容，越详细越好。非常感谢，祝愿大家心想事成，万事如意！ |
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shuoshine(金币+1):谢谢参与
shuoshine(金币+5): 2010-06-08 09:04:13
hawkyin(金币+1):谢谢回贴 2010-06-09 15:27:41
shuoshine(金币+1):谢谢参与
shuoshine(金币+5): 2010-06-08 09:04:13
hawkyin(金币+1):谢谢回贴 2010-06-09 15:27:41
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我师兄做过ACE抑制活性的测定： 用含有0.3mol/L NaCl的0.1mol/L硼酸盐缓冲液(pH8.3)将Hip-His-Leu配成5.0mmol/L的溶液。在10ml试管中加入200μl的5.0mmol/L Hip-His-Leu溶液和80μl的样品，于37℃保温3min后，再加入20μl ACE溶液(溶解于蒸馏水中，活力为0.1U/ml)，混匀后在37℃保温30min，再加入250μl的1.0mol/L的盐酸溶液以终止反应，再加入1.7ml醋酸乙酯，经15s振荡混匀后静置5min，用移液管吸取1.0ml的醋酸乙酯层，120℃烘箱烘干，加入1.0ml蒸馏水，混匀后在波长228nm处测定吸光度。在上述条件下，抑制50%的ACE活性(IC50)为样品的一个活性单位。 ACE抑制率（%）=（B-A）/A×100% 式中：A为含有样品和ACE溶液的吸光度；B为不含样品，但含有ACE溶液的吸光度。 |
7楼2010-06-07 17:47:32
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嗯，这个具体的我也不知道，O(∩_∩)O~因为师兄毕业了。等我问了再告诉你吧。 我查了几篇文献，你可以参考一下。前两篇中的ACE抑制率的公式是和你说的一样的。 ACE-inhibitory peptides identified from the muscle protein hydrolysate of hard clam(Meretrix lusoria) Process Biochemistry 43 (2008) 743–747 Angiotensin I-converting enzyme (ACE) inhibitory activities of sardinelle (Sardinella aurita)by-products protein hydrolysates obtained by treatment with microbial and visceral fish serine proteases Food Chemistry 111 (2008) 350–356 Antihypertensive effect of an angiotensin I-converting enzyme inhibitory peptide from bullfrog(Rana catesbeiana Shaw) muscle protein in spontaneously hypertensive rats Process Biochemistry 42 (2007) 1443–1448 |
9楼2010-06-08 16:16:56
2楼2010-06-07 11:18:25
remainlove
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3楼2010-06-07 14:27:25
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5楼2010-06-07 15:29:19
6楼2010-06-07 15:55:57
8楼2010-06-08 09:10:36
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