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weip

铜虫 (小有名气)


shuoshine(金币+1):谢谢参与
建议查看英文文献,具体名称不记得了
11楼2010-06-24 13:17:27
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army888888

至尊木虫 (文坛精英)


shuoshine(金币+1):谢谢参与
1  仪器与试剂
Agilent 1100 HPLC系统(Agilent,USA):高压二元泵、紫外检测器、在线脱气机、自动进样器;Agilent色谱工作站,Zorbax SB-Aq色谱柱(5µm,4.6×150mm, Agilent,USA),乙腈(色谱纯),马尿酸(色谱纯)。
2  样品预处理
取7ml待测样(豆乳或牛乳等)品置于50ml离心管,调pH至8.3,取1.8ml离心(10000g)10min,取清液,待ACE抑制率测定。
1.8ml离心管中加40ul 10mM HHL(溶于0.3M NaCl,0.1M 硼酸缓冲溶液,pH 8.3)和40ul已预处理样品混合后再加40ul 10mU/ml ACE(溶于0.3M NaCl,0.1M 硼酸缓冲溶液,pH 8.3)混合(转速约达8000转/分时停转),37℃(空气摇床,恒温水浴)反应30min,取出离心管,立即转入已准备好的85℃水浴中灭活5min后冷却、离心(转速约达8000转/分时停转)加120 ul高纯水离心混合(转速约达8000转/分时停转)后经0.45µm过滤待测马尿酸含量。
另外再做40ulHHL+40ul水+40ulACE(对照)和40ulHHL+80ul水的样品(平行3次)。
ACE抑制率按下式计算:
ACE抑制率(%) = ([HA]c –([HA]s-[HA]b) / ([HA]c – [HA]H) × 100%
式中,[HA]c:对照样品马尿酸浓度(加缓冲液);[HA]s:待测样品的马尿酸浓度;[HA]b :空白样中的马尿酸浓度;[HA]H:HHL标准品中所含马尿酸浓度。
若你们测定的空白样品中没有马尿酸的话,可以不测空白样品的马奶酸含量,以便减少工作量。
3  色谱条件
流动相:0.1%TFA水溶液和0.1%TFA乙腈溶液,体积比为75∶25;流速1.5 ml/min;紫外检测波长228nm;柱温:35℃;进样量:10μl。
4  绘制工作曲线
将马尿酸标准品1.00,5.00,10.00,20.00和50.00 mg/ml系列浓度进样分析,测定相应峰面积后进行线性回归。
12楼2010-06-30 17:05:22
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李裸王

金虫 (小有名气)


shuoshine(金币+1): 谢谢参与
你好,本人也是在测ACE酶的抑制活性,可以交流一下ACE酶的使用吗?QQ2238795579
ONEPIECE
13楼2015-04-13 09:29:49
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乌臼-547

新虫 (初入文坛)


shuoshine(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
7楼: Originally posted by 玉兰花 at 2010-06-07 17:47:32
我师兄做过ACE抑制活性的测定:
用含有0.3mol/L NaCl的0.1mol/L硼酸盐缓冲液(pH8.3)将Hip-His-Leu配成5.0mmol/L的溶液。在10ml试管中加入200μl的5.0mmol/L Hip-His-Leu溶液和80μl的样品,于37℃保温3min后,再加 ...

你好,我现在也准备体外测ACE抑制率,你师兄的这个方法有发文章么??能不能搜得到?
14楼2015-07-01 10:56:42
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18822073576

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 玉兰花 at 2010-06-07 17:47:32
我师兄做过ACE抑制活性的测定:
用含有0.3mol/L NaCl的0.1mol/L硼酸盐缓冲液(pH8.3)将Hip-His-Leu配成5.0mmol/L的溶液。在10ml试管中加入200μl的5.0mmol/L Hip-His-Leu溶液和80μl的样品,于37℃保温3min后,再加 ...

样品是什么?

发自小木虫Android客户端
15楼2017-03-21 09:33:54
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Lxd2018

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 玉兰花 at 2010-06-07 17:47:32
我师兄做过ACE抑制活性的测定:
用含有0.3mol/L NaCl的0.1mol/L硼酸盐缓冲液(pH8.3)将Hip-His-Leu配成5.0mmol/L的溶液。在10ml试管中加入200μl的5.0mmol/L Hip-His-Leu溶液和80μl的样品,于37℃保温3min后,再加 ...

ACE溶液,是直接向ACE小瓶中注射蒸馏水?注射多少?

发自小木虫Android客户端
16楼2018-03-20 15:25:55
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Lxd2018

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
送红花一朵
引用回帖:
1楼: Originally posted by shuoshine at 2010-06-07 10:51:18
各位有没有做过ACE抑制活性的体外测定的,即ACE与HHL反应生成马尿酸的分光光度法测定。本人实验几次结果均不理想,现求助具体测定方法内容,越详细越好。非常感谢,祝愿大家心想事成,万事如意!

ACE在120℃下活性不受影响呢?

发自小木虫Android客户端
17楼2018-03-23 09:53:45
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