| 查看: 3509 | 回复: 16 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
【求助】求助ACE抑制活性的测定方法 已有7人参与
|
|||
| 各位有没有做过ACE抑制活性的体外测定的，即ACE与HHL反应生成马尿酸的分光光度法测定。本人实验几次结果均不理想，现求助具体测定方法内容，越详细越好。非常感谢，祝愿大家心想事成，万事如意！ |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
Lxd2018» 猜你喜欢
国社科又开始会评了，不知道这次命运如何
已经有14人回复
-
基金评审意见有问题
已经有5人回复
-
食品科学论文润色/翻译怎么收费?
已经有258人回复
-
根癌农杆菌A136
已经有1人回复
-
🔥颠覆认知｜缺镁，可能悄悄偷走你的好心情
已经有0人回复
-
安徽省基金今年为什么开始的这么晚，本子什么时候送审，各位大神有了解的吗
已经有3人回复
-
Invitation to Explore China's Qiming Talent Program
已经有2人回复
-
中国启明计划// China's Qiming Talent Program
已经有0人回复
-
【专题讨论】果糖代谢科普辨析：天然水果果糖不等同于添加果糖，适合营养实训教学案例
已经有0人回复
-
北京工商大学曹锦轩课题组招收2027年博士生
已经有206人回复
army888888
至尊木虫 (文坛精英)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 37686.8
- 散金: 797
- 红花: 5
- 帖子: 19137
- 在线: 935小时
- 虫号: 825666
- 注册: 2009-08-10
- 性别: GG
- 专业: 生物化工与食品化工
★
shuoshine(金币+1):谢谢参与
shuoshine(金币+1):谢谢参与
|
1 仪器与试剂 Agilent 1100 HPLC系统（Agilent，USA）：高压二元泵、紫外检测器、在线脱气机、自动进样器；Agilent色谱工作站，Zorbax SB-Aq色谱柱（5µm,4.6×150mm, Agilent，USA)，乙腈（色谱纯），马尿酸（色谱纯）。 2 样品预处理 取7ml待测样（豆乳或牛乳等）品置于50ml离心管，调pH至8.3，取1.8ml离心（10000g）10min，取清液，待ACE抑制率测定。 1.8ml离心管中加40ul 10mM HHL（溶于0.3M NaCl，0.1M 硼酸缓冲溶液，pH 8.3）和40ul已预处理样品混合后再加40ul 10mU/ml ACE（溶于0.3M NaCl，0.1M 硼酸缓冲溶液，pH 8.3）混合（转速约达8000转/分时停转），37℃(空气摇床，恒温水浴)反应30min，取出离心管，立即转入已准备好的85℃水浴中灭活5min后冷却、离心（转速约达8000转/分时停转）加120 ul高纯水离心混合（转速约达8000转/分时停转）后经0.45µm过滤待测马尿酸含量。 另外再做40ulHHL+40ul水+40ulACE（对照）和40ulHHL+80ul水的样品（平行3次）。 ACE抑制率按下式计算： ACE抑制率(%) = ([HA]c –（[HA]s-[HA]b) / ([HA]c – [HA]H) × 100% 式中，[HA]c：对照样品马尿酸浓度（加缓冲液）；[HA]s：待测样品的马尿酸浓度；[HA]b ：空白样中的马尿酸浓度；[HA]H：HHL标准品中所含马尿酸浓度。 若你们测定的空白样品中没有马尿酸的话，可以不测空白样品的马奶酸含量，以便减少工作量。 3 色谱条件 流动相：0.1%TFA水溶液和0.1%TFA乙腈溶液，体积比为75∶25；流速1.5 ml/min；紫外检测波长228nm；柱温：35℃；进样量：10μl。 4 绘制工作曲线 将马尿酸标准品1.00，5.00，10.00，20.00和50.00 mg/ml系列浓度进样分析，测定相应峰面积后进行线性回归。 |
12楼2010-06-30 17:05:22
2楼2010-06-07 11:18:25
remainlove
木虫 (正式写手)
- 应助: 31 (小学生)
- 金币: 2468.6
- 散金: 130
- 红花: 2
- 帖子: 571
- 在线: 190.8小时
- 虫号: 973191
- 注册: 2010-03-16
- 性别: GG
- 专业: 食品科学基础
3楼2010-06-07 14:27:25
4楼2010-06-07 15:25:34
