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采云子molly

新虫 (初入文坛)

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专业: 环境微生物学

[求助] 木酮糖激酶活性测定问题

大家好，我是做木糖酿酒酵母育种的。目前的试验是测定重组菌株的木酮糖激酶的酶活。按照文献配制了协同反应物。做标曲的时候遇到问题。
ATP、PEP、NADH 是用pH7.0的Tris-HCl 溶解的，分装保存于-80℃，PK、LDH同样用pH7.0的Tris-HCl 溶解，保存于-20℃。已经做了一周的标曲了。
出现两个问题，1. 对NADH做时间扫描，不稳定。2. 同一浓度在数据稳定情况下，数据不一致，重复性差。
请各位大神不吝赐教。

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