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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 真菌破碎方法
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siyuansing

银虫 (小有名气)

[求助] 真菌破碎方法 已有5人参与

需要破碎真菌，提取胞内的小分子化合物，做定量分析，找到了几种方法：
1.超生破碎，查了挺多资料，有说超生破碎的效果很差，不能够破碎完全；
2.液氮研磨，师兄说液氮研磨是最好的破碎细胞的方法，能够破碎完全，不知道具体情况如何；
3.碱裂解，操作复杂，耗时较长。

还请各位大神帮忙分析一下几种破碎方法的优劣，谢谢各位了！
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1楼 2015-04-08 16:44:41
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rainsunne

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by cashq at 2015-04-13 17:49:55
我之前提取酵母的mRNA和内源蛋白时候用的是玻璃珠+多样品组织研磨机破碎细胞的。我提取的样品比较多，所以都是把酵母放EP管然后成批研磨的~效果杠杠的

用超声做的话，要考虑升温问题，麻烦，而且出来的破碎效果还 ...

我也是做酵母的，现在要破碎的酵母量比较大。而且要求破碎效果要又快又好的才行，超声波完全不给力啊！！请问可以详细些说说具体操作吗？仪器什么的。谢谢了啊！在线等，急！
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9楼2015-04-16 09:46:42
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浴火月

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励交流！ 2015-04-09 08:17:47
siyuansing: 金币+8, ★★★很有帮助 2015-04-09 21:41:10
超声一般破碎原核细胞效果较好，真核较难破碎；我们一般也是用液氮研磨破碎真核细胞的。
关于碱裂解，目前我们做的是关于酵母的，其他菌的情况还不太清楚。操作确实繁杂~~
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2楼2015-04-08 21:28:25
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贝叶竹青

木虫 (著名写手)
种类很多，应该根据实验室条件来选择最合适的方式

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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come to meet a different you.努力到无能为力，拼搏到感动自己。
3楼2015-04-09 02:13:27
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Freedomqqc

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
siyuansing: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-04-09 21:41:40
我研一做的酵母，提取酵母DNA。我当时使用的是omega真菌试剂盒。它使用的是酶和玻璃珠双破碎方法。你可以适用一下。祝好
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科研不易，希望自己能够坚持
5楼2015-04-09 10:19:05
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