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骑猪看日出

铜虫 (小有名气)

[求助] 求助!!真菌拮抗试验

如题,初搞微生物,我看文献上用诱变后的菌株和出发菌株做拮抗试验,采用的是琼脂柱法,具体操作怎么弄得小虫不会,求高手解答!先谢过……
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necilyx

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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amisking: 金币+5, MicEPI+1, 鼓励发帖提供有帮助的信息! 2012-03-20 18:09:25
骑猪看日出: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 很详细,让我这个外行人也看出了门道,很感谢! 2012-03-21 08:07:55
琼脂柱法是一种高通量筛选,你要买到打孔器,有几种规格的估计直径1~2cm的就差不多。对诱变后的菌涂布平板,当长出单菌落(注意一定要是单个菌落不能让菌落连成一片)后用灭好菌的打孔器将单个菌落打孔(同时可以用牙签沾取少量每个琼脂柱上的菌点种于另一个平板标号作为备份),注意要将整个菌落在你打下的琼脂柱中间,然后将琼脂柱倒置在刚刚涂布好的指示菌上,排列整齐,盖上盖在盖上进行标号,标号与做备份的一致,最后培养箱培养。这样只需要观察培养后的指示菌的生长情况既可以判断琼脂柱上的单菌落是否对指示菌有拮抗作用。这种方法的筛选效率较高,建议筛选选用大平板。
聪明才智要为意外做准备~~
4楼2012-03-20 16:29:48
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匿名

用户注销 (正式写手)

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5楼2012-03-21 02:38:30
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power5

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我们是用打孔器取上一小片琼脂,不是知道是不是lz说的琼脂柱法
2楼2012-03-20 11:11:40
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骑猪看日出

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by power5 at 2012-03-20 11:11:40:
我们是用打孔器取上一小片琼脂,不是知道是不是lz说的琼脂柱法

没有做过,我觉得应该是吧,什么时候打孔,是在菌好还是刚接完菌?拮抗菌用不用也打孔?还是怎么做啊?求详细操作,谢谢!!
3楼2012-03-20 12:13:13
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骑猪看日出

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by necilyx at 2012-03-20 16:29:48:
琼脂柱法是一种高通量筛选,你要买到打孔器,有几种规格的估计直径1~2cm的就差不多。对诱变后的菌涂布平板,当长出单菌落(注意一定要是单个菌落不能让菌落连成一片)后用灭好菌的打孔器将单个菌落打孔(同时可以 ...

还有一个问题,它们拮抗的机理是什么?是营养竞争吗?还是能产生抑制因子
6楼2012-03-21 08:08:55
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骑猪看日出

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 周游1166 at 2012-03-21 02:38:30:
真菌和细菌的拮抗实验不一样,操作有些不同。主要是由于菌落的形态特征。 看你的是什么。

白腐真菌-侧耳属
7楼2012-03-21 08:10:00
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power5

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 骑猪看日出 at 2012-03-20 12:13:13:
没有做过,我觉得应该是吧,什么时候打孔,是在菌好还是刚接完菌?拮抗菌用不用也打孔?还是怎么做啊?求详细操作,谢谢!!

肯定是菌长好了再打孔打出来阿,
8楼2012-03-21 08:51:33
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necilyx

金虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 骑猪看日出 at 2012-03-21 08:08:55:
还有一个问题,它们拮抗的机理是什么?是营养竞争吗?还是能产生抑制因子

这两种方式都可能产生拮抗作用,具体是哪一个需要研究突变株和出发菌株生长和代谢上的差异,可以在菌落形态上次级代谢产物的成分等方面入手。
聪明才智要为意外做准备~~
9楼2012-03-21 08:54:46
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骑猪看日出

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by necilyx at 2012-03-21 08:54:46:
这两种方式都可能产生拮抗作用,具体是哪一个需要研究突变株和出发菌株生长和代谢上的差异,可以在菌落形态上次级代谢产物的成分等方面入手。

如果没有代谢产物的话,就只能是营养竞争了吧?我养的是白腐真菌
10楼2012-03-21 08:58:49
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