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新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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帖子: 13
在线: 36.4小时
虫号: 2835492
注册: 2013-11-29
专业: 微生物生理与生物化学

[求助] 请PCR的问题已有7人参与

大家好，我现在做普通PCR，跑电泳的结果一直不理想，希望大家给些意见，希望早点做出结果的，谢谢啦

体系（25μL）
ddH2O       12
primer1       5
primer2       5
2×buffer    62.5
Taq 酶          0.5
dNTP          10
模板             5
                        A             B                   C                D
镁离子                0             0.5                1                1.5
ddH20                5             4.5                4                3.5
附件图片中温度为55摄氏度，已经做了54,55,56,57,60的退火温度，但结果一直都是这样，区别不大。

请PCR的问题

IMG_20150401_210152.jpg

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1楼 2015-04-04 16:41:05

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王平阳

金虫 (正式写手)

MolEPI: 2
应助: 124 (高中生)
金币: 968.1
散金: 30
红花: 30
帖子: 413
在线: 105.5小时
虫号: 1222296
注册: 2011-03-05
性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能

【答案】应助回帖

反应体系太混乱了，buffer加那么多，还是优化一下反应体系吧，第一次见这种反应体系。

没有做不到，只有想不到！

16楼2015-04-08 11:20:56

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

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