24小时热门版块排行榜    

查看: 844  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wobaby

铁虫 (著名写手)

[交流] 琼脂糖凝胶电泳pET28

做琼脂糖凝胶电泳实验,质粒为pET28.  与药物抚育24h,48h。loding buffer已经到顶了,但药物与质粒的混合物,爬的高度都只有凝胶的1/3,未爬起来,也就无法识别两者的作用效果。
   不知道问题出在哪里?
1)质粒有问题?浓度太大?
     单独的质粒做对照,也只爬1/3
2) 凝胶也不会有问题,以前一样操作
    大牛帮忙指点下,谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

http://emuch.net/bbs/viewthread.php?tid=5374021&pid=9#pid9
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wobaby

铁虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 781055707 at 2015-03-28 23:25:22
BUFFER是沉淀质粒,它在电泳里跑的本来就和质粒不是一起的。

刚才想到了问题所在,就向你说的buffer直观显示爬的状态,但是不同的质粒可能由于分子量不同,在相同电压条件下,爬的高度也不同,所以增加电泳时间,可以解决爬板才有1/3的问题,谢谢
http://emuch.net/bbs/viewthread.php?tid=5374021&pid=9#pid9
5楼2015-03-30 06:32:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

781055707

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-03-28 23:29:20
pet28表达行质粒,正常片段是在5500左右,但常会在9000及其12000处出现环状和超螺旋,出现几率及高。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
采菊东篱下,悠然见南山。
2楼2015-03-28 00:02:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wobaby

铁虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 781055707 at 2015-03-28 00:02:30
pet28表达行质粒,正常片段是在5500左右,但常会在9000及其12000处出现环状和超螺旋,出现几率及高。

谢谢,我的问题是,爬凝胶板高度问题。正常情况是爬到4/5的高度。目前爬loading buffer爬到4/5,但是质粒才爬到1/3。
http://emuch.net/bbs/viewthread.php?tid=5374021&pid=9#pid9
3楼2015-03-28 10:58:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

781055707

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
wobaby: 金币+5 2015-03-30 06:32:54
BUFFER是沉淀质粒,它在电泳里跑的本来就和质粒不是一起的。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
采菊东篱下,悠然见南山。
4楼2015-03-28 23:25:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856材料求调剂 +12 hyf hyf hyf 2026-02-28 13/650 2026-03-02 20:19 by hypershenger
[考研] 材料270求调剂 6+4 Eiiiio 2026-03-01 7/350 2026-03-02 20:17 by hypershenger
[考研] 材料284求调剂,一志愿郑州大学英一数二专硕 +15 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 15/750 2026-03-02 20:13 by hypershenger
[考研] 中国科学技术大学材料与化工281求调剂,有科研和获奖经历 +5 wsxw 2026-03-02 5/250 2026-03-02 20:12 by hypershenger
[考研] 材料类考研调剂 +3 gemmgemm 2026-03-01 4/200 2026-03-02 20:02 by hypershenger
[考研] 材料复试调剂 +5 学材料的点 2026-03-01 6/300 2026-03-02 20:01 by hypershenger
[考研] 0854总分272 +3 打小就是老实人 2026-03-02 4/200 2026-03-02 19:49 by 求调剂zz
[考研] 295求调剂。一志愿报考郑州大学化学工艺学硕,总分295分 +7 yl1 2026-03-02 7/350 2026-03-02 19:03 by zhukairuo
[考研] 高分子化学与物理调剂 +6 好好好1233 2026-02-28 15/750 2026-03-02 18:47 by caszguilin
[考研] 284求调剂 +5 天下熯 2026-03-02 5/250 2026-03-02 18:38 by caszguilin
[考研] 一志愿山东大学材料与化工325求调剂 +5 半截的诗0927 2026-03-02 5/250 2026-03-02 18:37 by 明亮9527
[考研] 289求调剂 +3 BrightLL 2026-03-02 3/150 2026-03-02 17:28 by 杨杨杨紫
[考研] 欢迎采矿、地质、岩土、计算机、人工智能等专业的同学报考 +6 pin8023 2026-02-28 8/400 2026-03-02 17:13 by 0854蹲调剂
[考研] 材料化工调剂 +12 今夏不夏 2026-03-01 14/700 2026-03-02 16:09 by 今夏不夏
[考研] 26考研报考西工大材料308分求调剂 +4 weizhong123 2026-03-01 4/200 2026-03-02 12:46 by 无际的草原
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +6 礼堂丁真258 2026-02-28 9/450 2026-03-02 12:04 by 52hz~~
[考研] 281求调剂 +5 2026计算机_诚心 2026-03-01 8/400 2026-03-02 11:05 by 汪!?!
[考博] 26申博 +4 想申博! 2026-02-26 6/300 2026-03-01 17:32 by 想申博!
[考研] 290求调剂 +9 材料专硕调剂; 2026-02-28 11/550 2026-03-01 17:21 by sunny81
[考研] 307求调剂 +5 wyyyqx 2026-03-01 5/250 2026-03-01 15:21 by Fff-1
信息提示
请填处理意见