24小时热门版块排行榜    

查看: 943  |  回复: 4

wobaby

铁虫 (著名写手)

[交流] 琼脂糖凝胶电泳pET28

做琼脂糖凝胶电泳实验,质粒为pET28.  与药物抚育24h,48h。loding buffer已经到顶了,但药物与质粒的混合物,爬的高度都只有凝胶的1/3,未爬起来,也就无法识别两者的作用效果。
   不知道问题出在哪里?
1)质粒有问题?浓度太大?
     单独的质粒做对照,也只爬1/3
2) 凝胶也不会有问题,以前一样操作
    大牛帮忙指点下,谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

http://emuch.net/bbs/viewthread.php?tid=5374021&pid=9#pid9
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

781055707

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-03-28 23:29:20
pet28表达行质粒,正常片段是在5500左右,但常会在9000及其12000处出现环状和超螺旋,出现几率及高。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
采菊东篱下,悠然见南山。
2楼2015-03-28 00:02:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wobaby

铁虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 781055707 at 2015-03-28 00:02:30
pet28表达行质粒,正常片段是在5500左右,但常会在9000及其12000处出现环状和超螺旋,出现几率及高。

谢谢,我的问题是,爬凝胶板高度问题。正常情况是爬到4/5的高度。目前爬loading buffer爬到4/5,但是质粒才爬到1/3。
http://emuch.net/bbs/viewthread.php?tid=5374021&pid=9#pid9
3楼2015-03-28 10:58:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

781055707

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
wobaby: 金币+5 2015-03-30 06:32:54
BUFFER是沉淀质粒,它在电泳里跑的本来就和质粒不是一起的。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
采菊东篱下,悠然见南山。
4楼2015-03-28 23:25:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wobaby

铁虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 781055707 at 2015-03-28 23:25:22
BUFFER是沉淀质粒,它在电泳里跑的本来就和质粒不是一起的。

刚才想到了问题所在,就向你说的buffer直观显示爬的状态,但是不同的质粒可能由于分子量不同,在相同电压条件下,爬的高度也不同,所以增加电泳时间,可以解决爬板才有1/3的问题,谢谢
http://emuch.net/bbs/viewthread.php?tid=5374021&pid=9#pid9
5楼2015-03-30 06:32:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wobaby 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 11/550 2026-08-13 10:40 by ZH远山
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +9 瞬息宇宙 2026-08-12 9/450 2026-08-13 10:12 by Vivilian
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[基金申请] filecode +13 documentary 2026-08-10 15/750 2026-08-12 15:56 by 云上清扬
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
信息提示
请填处理意见