24小时热门版块排行榜    

查看: 930  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wobaby

铁虫 (著名写手)

[交流] 琼脂糖凝胶电泳pET28

做琼脂糖凝胶电泳实验,质粒为pET28.  与药物抚育24h,48h。loding buffer已经到顶了,但药物与质粒的混合物,爬的高度都只有凝胶的1/3,未爬起来,也就无法识别两者的作用效果。
   不知道问题出在哪里?
1)质粒有问题?浓度太大?
     单独的质粒做对照,也只爬1/3
2) 凝胶也不会有问题,以前一样操作
    大牛帮忙指点下,谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

http://emuch.net/bbs/viewthread.php?tid=5374021&pid=9#pid9
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wobaby

铁虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 781055707 at 2015-03-28 00:02:30
pet28表达行质粒,正常片段是在5500左右,但常会在9000及其12000处出现环状和超螺旋,出现几率及高。

谢谢,我的问题是,爬凝胶板高度问题。正常情况是爬到4/5的高度。目前爬loading buffer爬到4/5,但是质粒才爬到1/3。
http://emuch.net/bbs/viewthread.php?tid=5374021&pid=9#pid9
3楼2015-03-28 10:58:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

781055707

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-03-28 23:29:20
pet28表达行质粒,正常片段是在5500左右,但常会在9000及其12000处出现环状和超螺旋,出现几率及高。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
采菊东篱下,悠然见南山。
2楼2015-03-28 00:02:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

781055707

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
wobaby: 金币+5 2015-03-30 06:32:54
BUFFER是沉淀质粒,它在电泳里跑的本来就和质粒不是一起的。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
采菊东篱下,悠然见南山。
4楼2015-03-28 23:25:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wobaby

铁虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 781055707 at 2015-03-28 23:25:22
BUFFER是沉淀质粒,它在电泳里跑的本来就和质粒不是一起的。

刚才想到了问题所在,就向你说的buffer直观显示爬的状态,但是不同的质粒可能由于分子量不同,在相同电压条件下,爬的高度也不同,所以增加电泳时间,可以解决爬板才有1/3的问题,谢谢
http://emuch.net/bbs/viewthread.php?tid=5374021&pid=9#pid9
5楼2015-03-30 06:32:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +7 Lanmanbaby 2026-08-09 13/650 2026-08-09 19:04 by 天神眷顾
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 5/250 2026-08-08 21:54 by 13586093586
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 好奇怪的filecode +3 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-08 17:46 by zhanghaozhu
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 17:19 by oEVWOejN9taj
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:22 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:19 by oEVWOejN9taj
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 5/250 2026-08-08 15:59 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 6/300 2026-08-08 15:07 by oEVWOejN9taj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:42 by oEVWOejN9taj
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:39 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:22 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:01 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的,举个手。玩一下,释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
请填处理意见