24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1228  |  回复: 3
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

胡霞liu

新虫 (初入文坛)

[求助] WB 蛋白技术 已有2人参与

各位WB达人,请问做磷酸化蛋白WB的时候,蛋白样品处理方面需要注意一些什么呢?收了细胞直接冻-80好一些,还是细胞裂解之后冻-80呢,还是加loading buffer煮完之后存放好一些呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lidong.0107

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你可以加药时间分开,收集时间在一起就可以了;实在不行你就煮完放冰箱冻存就没问题了
4楼2015-03-26 15:38:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

sc5921041

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-03-26 08:24:14
磷酸化蛋白检测最好收了细胞马上做WB,一般不会冻起来的,除非你要用的是非常好用的commercial抗体,比如Cell Signaling 的p-AKT(s473), p-S6等等, 并且注意裂解细胞时 要加磷酸酶抑制剂。
nostalgia
2楼2015-03-26 01:26:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

胡霞liu

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sc5921041 at 2015-03-26 01:26:13
磷酸化蛋白检测最好收了细胞马上做WB,一般不会冻起来的,除非你要用的是非常好用的commercial抗体,比如Cell Signaling 的p-AKT(s473), p-S6等等, 并且注意裂解细胞时 要加磷酸酶抑制剂。

你好,我需要收4个时间点的细胞一起做WB,这样就面临一个问题,要么收一次细胞裂解一次,然后冻起来,最后统一煮蛋白变性,做WB;要么收一次细胞就冻起来,收完后统一提蛋白,变性,跑电泳。所以达不到收完细胞就马上做WB这个标准。请问该如何处理呢?
3楼2015-03-26 09:02:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 299求调剂 +8 15188958825 2026-03-25 8/400 2026-03-29 01:36 by fmesaito
[考研] 一志愿太原理工安全工程300分,求调剂 +5 0857求调剂. 2026-03-24 6/300 2026-03-28 22:04 by zhq0425
[考研] 11408软件工程求调剂 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 21:50 by zhq0425
[考研] 085701求调剂初试286分 +4 secret0328 2026-03-28 4/200 2026-03-28 21:09 by 15366876211
[考研] 生物学学硕,一志愿湖南大学,初试成绩338 +6 YYYYYNNNNN 2026-03-26 7/350 2026-03-28 20:52 by 唐沐儿
[考研] 求调剂 +6 芦lty 2026-03-25 7/350 2026-03-28 13:13 by 唐沐儿
[考研] 0856,材料与化工321分求调剂 +12 大馋小子 2026-03-27 13/650 2026-03-28 10:56 by self2008
[考研] 277跪求调剂 +5 1915668 2026-03-27 9/450 2026-03-28 09:58 by zhshch
[考研] 272求调剂 +7 脚滑的守法公民 2026-03-27 7/350 2026-03-27 17:23 by laoshidan
[考研] 一志愿南师大0703化学 275求调剂 +4 Ripcord上岸 2026-03-27 4/200 2026-03-27 17:00 by zhyzzh
[考研] 308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-25 7/350 2026-03-27 14:47 by 狂炫麦当当
[考研] 材料求调剂 +5 .m.. 2026-03-25 5/250 2026-03-27 11:08 by 不吃魚的貓
[考研] 求调剂323材料与化工 +7 1124361 2026-03-24 7/350 2026-03-27 10:22 by wangjy2002
[考研] 0703化学求调剂 +3 丹青奶盖 2026-03-26 5/250 2026-03-26 20:11 by macy2011
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:26 by 星空星月
[考研] 289材料与化工(085600)B区求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:20 by mx.yue
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
[考研] 化工专硕求调剂 +3 question挽风 2026-03-24 3/150 2026-03-24 18:48 by jhhcooi
[考研] 材料专硕331求调剂 +4 鲜当牛 2026-03-24 4/200 2026-03-24 15:58 by JourneyLucky
[考研] 接收2026硕士调剂(学硕+专硕) +4 allen-yin 2026-03-23 6/300 2026-03-23 15:04 by 汪!?!
信息提示
请填处理意见