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有木有人知道，提取植物RNA的分子水平的原理，是怎样与DNA分离的？ 已有1人参与
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| 提取植物RNA的分子水平原理，是怎样与DNA分离的，百度上的都没有详细的说明DNA和蛋白时怎样分离出去的，细胞内部环境在提取液中经历了什么过程？知道的人解答下，O(∩_∩)O谢谢！ |
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3楼2015-03-18 16:45:16
1002432022
金虫 (小有名气)
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
大懒猫爱生物: 金币+5 2015-03-19 10:58:34
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大懒猫爱生物: 金币+5 2015-03-19 10:58:34
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在植物的RNA抽提实验中，广泛应用的是TRIzol法。 TRIzol主要物质是异硫氰酸胍，它可以破坏细胞使ＲＮＡ释放出来的同时，保护ＲＮＡ的完整性 。加入氯仿后离心，样品分成水样层和有机层。RNA存在于水样层中。收集上面的的水样层后，RNA 可以通过异丙醇沉淀来还原。在除去水样层后，样品中的DNA 和蛋白也能相继以沉淀的方式还原。乙醇沉淀能析出中间层的DNA，在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白。 TRIzol的主要成分是酚.主要作用是裂解细胞,使细胞中的蛋白,核酸物质得到释放.同时 TRIzol里加入了可以抑制RNA酶的胍盐.作用自然是抑制RNA酶了.氯仿可以使蛋白变性 ,降低蛋白的溶解度,异丙醇是沉淀RNA的,降低了RNA在氯仿中的溶解度.因为这些试剂都会影响后续实验,所以用酒精洗一到两遍.一是酒精可以溶解一些沉淀中可能的有机物杂质,二是洗掉异丙醇,氯仿试剂,酒精的易挥发性 在这里的到运用。 |
2楼2015-03-18 15:15:34
