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巢式PCR二轮产物，点样孔似有两点跑不出？？？急急急！！！ 已有1人参与
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求助内容如题，之前看到有相同的问题，我的情况是这样的： 阳性对照用的全基因组能稳定的P出目标条带来，但是样品提取DNA后，就会出现这种情况。样品中的阳性样品最开始能够很正常的跑出来，但是放置1周左右，就只能出现点样孔有亮点，不出条带，引物二聚体可出现。4°和-20°保存都是这种情况，DNA也反复提取多次，现在直接就不能出现目标条带了！！！ 急求解决办法，之前看到有师兄师姐说是可以加SDS，我想知道加多少量在哪一步加合适？ |
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【答案】应助回帖
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也有可能没有降解啊，如果模板没有降解但是又没有扩增出来，那可以考虑所用试剂的问题，是否是酶的扩增效率太差了没有进行镁离子浓度的尝试，加入的DMSO的量啊等等（个人建议尝试热启动Taq酶效果很好http://www.detaibio.com/relia-hotstart-polymerase.html），分子实验因素多样都应该纳入考虑范围，祝 实验顺利哦  |
7楼2015-03-16 13:19:26
