24小时热门版块排行榜    

查看: 1376  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

北欧神鱼

金虫 (小有名气)

[求助] 巢式PCR二轮产物,点样孔似有两点跑不出???急急急!!! 已有1人参与

求助内容如题,之前看到有相同的问题,我的情况是这样的:
阳性对照用的全基因组能稳定的P出目标条带来,但是样品提取DNA后,就会出现这种情况。样品中的阳性样品最开始能够很正常的跑出来,但是放置1周左右,就只能出现点样孔有亮点,不出条带,引物二聚体可出现。4°和-20°保存都是这种情况,DNA也反复提取多次,现在直接就不能出现目标条带了!!!
急求解决办法,之前看到有师兄师姐说是可以加SDS,我想知道加多少量在哪一步加合适?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

北欧神鱼

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-03-16 11:06:39
没有条带,引物二聚体清楚,量拖尾都没有啊,根据你的描述,模板降解啦,初步这样认为的,可以重提跑试试看嘛...

我也怀疑如此,之前看到有人提到SDS,我就有点侥幸,万一没降解呢。。。
5楼2015-03-16 12:29:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不出条带,点样孔有亮点,那是否条带出现整体拖尾呢?
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
2楼2015-03-16 10:25:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

北欧神鱼

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-03-16 10:25:44
不出条带,点样孔有亮点,那是否条带出现整体拖尾呢?

之前正常出目标条带的时候有出现过拖尾,但是我第二轮稀释模板以后就没有了。。。现在是没有条带出现,引物二聚体很清楚,不拖尾。
3楼2015-03-16 10:51:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

★ ★
北欧神鱼: 金币+2, 有帮助 2015-03-16 12:30:02
引用回帖:
3楼: Originally posted by 北欧神鱼 at 2015-03-16 10:51:09
之前正常出目标条带的时候有出现过拖尾,但是我第二轮稀释模板以后就没有了。。。现在是没有条带出现,引物二聚体很清楚,不拖尾。...

没有条带,引物二聚体清楚,量拖尾都没有啊,根据你的描述,模板降解啦,初步这样认为的,可以重提跑试试看嘛
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
4楼2015-03-16 11:06:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见