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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 毕赤酵母发酵罐发酵问题
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sjg_yuhuashi

木虫 (初入文坛)

[求助] 毕赤酵母发酵罐发酵问题 已有5人参与

大家好，我是一毕赤酵母发酵的新手，以前是做大肠杆菌的，工艺差不多稳定了，现在公司发展了要用毕赤酵母发酵，以前没整过，发了几次，有点难度，下面是本人一次发酵的结果，请各位前辈帮忙解惑下啊

SDS-PAGE电泳图请见附件

数字代表诱导时间，由于公司就我一个人弄发酵，所以晚上没人看着，这个是个大问题，但是最后一夜有点状况，早上来的时候PH上升的较多，而我补加氨水的速率比前一夜要慢了，甲醇流加速率不变，但前一夜的PH正常稳定啊，为什么最后一夜速率慢了PH反而还升高了？而且目的蛋白完全就没了呢？

毕赤酵母发酵罐发酵问题
20150202 pPIC310-HuEGF SMD1163(发酵罐).jpg
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1楼 2015-02-10 14:09:08
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

sjg_yuhuashi

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 青蛙良 at 2015-03-23 14:51:53
楼主你的问题解决了吗？我也遇到了相应的问题，不知道是否菌体老化降解造成的？

额，我想应该主要是晚上没人看管，PH值上升偏碱造成的，第二次发酵诱导了七十多个小时，PH值一直在6.5以下，没有发生降解的情况
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7楼2015-03-30 15:44:54
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普通回帖

刘文瑶

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
sjg_yuhuashi: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-03-30 15:47:32
溶氧有没有啥异常变化？譬如也回升了，确定甲醇补料没过量？
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2楼2015-03-02 16:22:05
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jesse860910

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你的DO怎么样 是不是也上升了？怀疑甲醇补的量不够 你没有另外补过其他碳源吧
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不抛弃不放弃
3楼2015-03-04 09:22:04
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hunter1984

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
zhang8826857: 金币+1, 鼓励应助 2015-03-04 17:41:49
sjg_yuhuashi: 金币+2, ★★★★★最佳答案 2015-03-30 15:52:29
肯定是甲醇补加不够，引起pH值上升，你看看溶氧是不是也上升了，是的话基本可以断定是营养不够
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4楼2015-03-04 15:09:50
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青蛙良

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

楼主你的问题解决了吗？我也遇到了相应的问题，不知道是否菌体老化降解造成的？
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乐观、自信、爱
5楼2015-03-23 14:51:53
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uranuser

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

发酵到后期，菌体开始衰老死亡了，一方面pH会上升，另一方面，菌体死亡破碎释放出的蛋白酶会降解你的目的产物，所以你的目的产物会减少。至于你说你补加氨水的速率比前一夜慢了，只能说明还是不够慢
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6楼2015-03-30 12:00:40
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sjg_yuhuashi

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 刘文瑶 at 2015-03-02 16:22:05
溶氧有没有啥异常变化？譬如也回升了，确定甲醇补料没过量？

恩，溶氧是上升了，但罐压夜是上升的，所以就不好确定了，甲醇应该是没有过量的，我补加速率相比手册和看过的文献而言要慢不少
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8楼2015-03-30 15:47:09
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sjg_yuhuashi

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jesse860910 at 2015-03-04 09:22:04
你的DO怎么样 是不是也上升了？怀疑甲醇补的量不够 你没有另外补过其他碳源吧

没有其他碳源啊，ＤＯ就不好说了，因为早上来的时候，罐压也是增大了的，应该是甲醇不够吧，毕竟发酵罐条件有限，再加快补料速率，溶氧就跟不上了
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9楼2015-03-30 15:49:37
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sjg_yuhuashi

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by hunter1984 at 2015-03-04 15:09:50
肯定是甲醇补加不够，引起pH值上升，你看看溶氧是不是也上升了，是的话基本可以断定是营养不够

额，溶氧真不好确定，因为晚上没人看守，早上来的时候罐压也是变大的，我猜估计也是碳源不够了，因为我的补加速率相对手册和别人的速率是慢了的，可是发酵罐条件有限，没法再加快了
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10楼2015-03-30 15:51:57
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