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hadesyanwei木虫 (职业作家)
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工厂大罐发酵的接种量等问题 已有2人参与
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企业正准备发酵放大的事，生产菌种是大肠杆菌，低温诱导表达一种胞内酶，发酵罐预计是5-10m3的。想请教下： 1 大肠杆菌的种子培养一般接种量是多少？具体的，一级种子如果是摇瓶培养的话，接入种子罐的接种量大概是多少？种子罐接入发酵罐的接种量又是多少？种子罐需要控制pH吗？ 2 大肠杆菌种子罐的培养基一般用什么配方？ 3 抗生素用量很少，工厂发酵罐上是怎么添加这种小量试剂的？ 4 大罐的管路是怎么灭菌的？ 麻烦分条回答吧，小弟谢谢各位大神啦！  |
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琅风虫虫
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【答案】应助回帖
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hadesyanwei: 金币+20, ★★★很有帮助, 谢谢，还是有参考价值的 2014-04-10 16:02:40
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1 大肠杆菌的种子培养一般接种量是多少？具体的，一级种子如果是摇瓶培养的话，接入种子罐的接种量大概是多少？种子罐接入发酵罐的接种量又是多少？种子罐需要控制pH吗？ 具体不清楚，我们做过芽孢，乳酸的比较多，一般工业的种子罐，500L的罐子，做300L，接3L的种子 300L的种子罐再接到8T的罐子里，芽孢是需要控制PH的，大肠杆菌不清楚 2 大肠杆菌种子罐的培养基一般用什么配方？ 工业配方很多都是保密的哟 3 抗生素用量很少，工厂发酵罐上是怎么添加这种小量试剂的？ 我们从接种口接过，大罐子上也有接种口，不过要大些 4 大罐的管路是怎么灭菌的？ （以我们的芽孢为例） 夹套排污---夹套升温（没有夹套就是蛇管升温）---升温到80度左右，开始3路进气--120度保持20分钟--夹套排污阀关--夹套通冷却水-冷却至接种温度 我们没有做过大肠杆菌，不过大罐子的灭菌过程相似，根据你的要求不同，来控制温度 |
2楼2014-04-10 15:43:37
【答案】应助回帖
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hadesyanwei: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-04-10 21:23:46
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我们是按1比100比例接种的 一级种子 种子罐接发酵罐按1比10转种 种子罐Ph变化不大 抗生素用虹吸接种枪，用蠕动泵打进去 夹套饱和蒸汽灭菌，换热器换热，121摄氏度，15分钟 |
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hadesyanwei3楼2014-04-10 20:33:37
hadesyanwei
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