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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药品生产 » 生产技术 » 工厂大罐发酵的接种量等问题
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hadesyanwei

木虫 (职业作家)

[求助] 工厂大罐发酵的接种量等问题已有2人参与

企业正准备发酵放大的事，生产菌种是大肠杆菌，低温诱导表达一种胞内酶，发酵罐预计是5-10m3的。想请教下：

1 大肠杆菌的种子培养一般接种量是多少？具体的，一级种子如果是摇瓶培养的话，接入种子罐的接种量大概是多少？种子罐接入发酵罐的接种量又是多少？种子罐需要控制pH吗？
2 大肠杆菌种子罐的培养基一般用什么配方？
3 抗生素用量很少，工厂发酵罐上是怎么添加这种小量试剂的？
4 大罐的管路是怎么灭菌的？

麻烦分条回答吧，小弟谢谢各位大神啦！
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1楼2014-04-10 11:08:40
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琅风虫虫

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hadesyanwei: 金币+20, ★★★很有帮助, 谢谢，还是有参考价值的 2014-04-10 16:02:40
1 大肠杆菌的种子培养一般接种量是多少？具体的，一级种子如果是摇瓶培养的话，接入种子罐的接种量大概是多少？种子罐接入发酵罐的接种量又是多少？种子罐需要控制pH吗？
具体不清楚，我们做过芽孢，乳酸的比较多，一般工业的种子罐，500L的罐子，做300L，接3L的种子
300L的种子罐再接到8T的罐子里，芽孢是需要控制PH的，大肠杆菌不清楚

2 大肠杆菌种子罐的培养基一般用什么配方？
工业配方很多都是保密的哟

3 抗生素用量很少，工厂发酵罐上是怎么添加这种小量试剂的？
我们从接种口接过，大罐子上也有接种口，不过要大些

4 大罐的管路是怎么灭菌的？
（以我们的芽孢为例）
  夹套排污---夹套升温（没有夹套就是蛇管升温）---升温到80度左右，开始3路进气--120度保持20分钟--夹套排污阀关--夹套通冷却水-冷却至接种温度


我们没有做过大肠杆菌，不过大罐子的灭菌过程相似，根据你的要求不同，来控制温度
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我家有女初长成
2楼2014-04-10 15:43:37
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dami200

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hadesyanwei: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-04-10 21:23:46
我们是按1比100比例接种的
一级种子

种子罐接发酵罐按1比10转种

种子罐Ph变化不大
抗生素用虹吸接种枪，用蠕动泵打进去
夹套饱和蒸汽灭菌，换热器换热，121摄氏度，15分钟
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hadesyanwei
积极向上
3楼2014-04-10 20:33:37
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hadesyanwei

木虫 (职业作家)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by dami200 at 2014-04-10 20:33:37
我们是按1比100比例接种的
一级种子

种子罐接发酵罐按1比10转种

种子罐Ph变化不大
抗生素用虹吸接种枪，用蠕动泵打进去
夹套饱和蒸汽灭菌，换热器换热，121摄氏度，15分钟

谢谢！
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4楼2014-04-10 21:24:28
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陆平2h

木虫 (正式写手)
都差不多的，教材都有

[ 发自小木虫客户端 ]
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5楼2014-04-13 09:44:50
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xuxuechao

铜虫 (小有名气)
接种量一般是5%-10%，7.2左右的PH，用基本的LB就可以吧
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自立自强，开心快乐
6楼2014-05-28 14:43:53
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日炪月岷

新虫 (初入文坛)
南通凯恒生物科技专业的培养基供应商，是一家以牛肉粉、牛胆盐、蛋白胨、酪蛋白胨、大豆蛋白胨、酵母浸粉、多价胨、胰蛋白胨、酸水解酪蛋白胨等原料（生化级、工业级和食品级）；制药、食品、环境、化妆品和疾控商检等行业适用的各种培养基产品为主的专业高新技术生产厂家。  可提供试用装，  需要的请联系  周先生 ：13285191880
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7楼2015-03-11 23:17:11
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小君沫沫

新虫 (初入文坛)
1.一级接种量0.2%；种子罐接种5%；种子罐需要控制ph，不知道你家种子罐是否有pH控制功能；
2.培养基是自家工艺研发的高表达培养基，不是普通LB培养基；
3.先把抗生素进行稀释，按比例添加；
4.SIP灭菌；一般罐体都带灭菌程序，设备安装调试时发酵罐厂家会告诉你如何做到灭菌无死角。
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8楼2015-03-12 11:02:36
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