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hadesyanwei

木虫 (职业作家)

[求助] 工厂大罐发酵的接种量等问题已有2人参与

企业正准备发酵放大的事,生产菌种是大肠杆菌,低温诱导表达一种胞内酶,发酵罐预计是5-10m3的。想请教下:

1 大肠杆菌的种子培养一般接种量是多少?具体的,一级种子如果是摇瓶培养的话,接入种子罐的接种量大概是多少?种子罐接入发酵罐的接种量又是多少?种子罐需要控制pH吗?
2 大肠杆菌种子罐的培养基一般用什么配方?
3 抗生素用量很少,工厂发酵罐上是怎么添加这种小量试剂的?
4 大罐的管路是怎么灭菌的?

麻烦分条回答吧,小弟谢谢各位大神啦!
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dami200

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hadesyanwei: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-04-10 21:23:46
我们是按1比100比例接种的
一级种子

种子罐接发酵罐按1比10转种

种子罐Ph变化不大
抗生素用虹吸接种枪,用蠕动泵打进去
夹套饱和蒸汽灭菌,换热器换热,121摄氏度,15分钟

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积极向上
3楼2014-04-10 20:33:37
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琅风虫虫

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hadesyanwei: 金币+20, ★★★很有帮助, 谢谢,还是有参考价值的 2014-04-10 16:02:40
1 大肠杆菌的种子培养一般接种量是多少?具体的,一级种子如果是摇瓶培养的话,接入种子罐的接种量大概是多少?种子罐接入发酵罐的接种量又是多少?种子罐需要控制pH吗?
具体不清楚,我们做过芽孢,乳酸的比较多,一般工业的种子罐,500L的罐子,做300L,接3L的种子
300L的种子罐再接到8T的罐子里,芽孢是需要控制PH的,大肠杆菌不清楚

2 大肠杆菌种子罐的培养基一般用什么配方?
工业配方很多都是保密的哟

3 抗生素用量很少,工厂发酵罐上是怎么添加这种小量试剂的?
我们从接种口接过,大罐子上也有接种口,不过要大些

4 大罐的管路是怎么灭菌的?
(以我们的芽孢为例)
  夹套排污---夹套升温(没有夹套就是蛇管升温)---升温到80度左右,开始3路进气--120度保持20分钟--夹套排污阀关--夹套通冷却水-冷却至接种温度


我们没有做过大肠杆菌,不过大罐子的灭菌过程相似,根据你的要求不同,来控制温度
我家有女初长成
2楼2014-04-10 15:43:37
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hadesyanwei

木虫 (职业作家)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by dami200 at 2014-04-10 20:33:37
我们是按1比100比例接种的
一级种子

种子罐接发酵罐按1比10转种

种子罐Ph变化不大
抗生素用虹吸接种枪,用蠕动泵打进去
夹套饱和蒸汽灭菌,换热器换热,121摄氏度,15分钟

谢谢!
4楼2014-04-10 21:24:28
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陆平2h

木虫 (正式写手)

都差不多的,教材都有

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-04-13 09:44:50
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