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elisa抗体选择问题已有2人参与
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如题,以前做过商业化的elisa,现因各种原因,必须要自己包板。 关键是抗原抗体的选择,是传统一抗+抗原+二抗的方法。 封闭的作用是不是避免抗原或者二抗直接连接到板子上? 1.抗原抗体是不是一定要一个公司的? 2.一抗是单克隆还是多克隆? 3.二抗是不是就是生物素化的抗体?二抗种类有什么要求么,跟一抗其实是一样的没啥区别? 拜谢!! |
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yelibio
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【答案】应助回帖
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没说清你包被的是什么,是抗原用竞争法还是双抗夹心?等等 你的问题很多,一个一个回答。 1、抗原抗体要匹配。有些公司再卖抗体的时候会给你相应的抗原的,也就是成对的卖。但如果你能自制也是不错的。对于大分子抗原来说用起来基本上都一样,对于小分子偶联抗原来说不同抗原使用效果不同。 2、一抗可以是单抗也可以是多抗,谁的效果好就用谁。 3、抗一抗的抗体叫二抗。 ELISA中的二抗是酶标二抗。就是用能催化底物显色的酶标记在二抗上。酶标二抗都商品化了,没必要自己做。 4、最重要的,就是二抗要与一抗相匹配,否则一抗二抗没法结合的。如一抗是鼠抗XXX,二抗就应该是羊抗鼠、兔抗鼠之类的。 |
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