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芦荟芦荟

新虫 (初入文坛)

[求助] elisa抗体选择问题 已有2人参与

如题,以前做过商业化的elisa,现因各种原因,必须要自己包板。
关键是抗原抗体的选择,是传统一抗+抗原+二抗的方法。

封闭的作用是不是避免抗原或者二抗直接连接到板子上?

1.抗原抗体是不是一定要一个公司的?
2.一抗是单克隆还是多克隆?
3.二抗是不是就是生物素化的抗体?二抗种类有什么要求么,跟一抗其实是一样的没啥区别?

拜谢!!
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彩虹之子1991

铜虫 (正式写手)

酶联免疫法吸附法用板子包被一抗的时候 为什么洗液洗不掉   而在加入二抗的时候,没有和一抗结合的游离二抗会被洗掉。难道二抗就不会直接包被到板子上马?求指教
如果说我是天才的话,请叫我努力型的天才。
4楼2015-09-16 22:29:34
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zb989931

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

没说清你包被的是什么,是抗原用竞争法还是双抗夹心?等等
你的问题很多,一个一个回答。
1、抗原抗体要匹配。有些公司再卖抗体的时候会给你相应的抗原的,也就是成对的卖。但如果你能自制也是不错的。对于大分子抗原来说用起来基本上都一样,对于小分子偶联抗原来说不同抗原使用效果不同。
2、一抗可以是单抗也可以是多抗,谁的效果好就用谁。  
3、抗一抗的抗体叫二抗。 ELISA中的二抗是酶标二抗。就是用能催化底物显色的酶标记在二抗上。酶标二抗都商品化了,没必要自己做。
4、最重要的,就是二抗要与一抗相匹配,否则一抗二抗没法结合的。如一抗是鼠抗XXX,二抗就应该是羊抗鼠、兔抗鼠之类的。
3楼2015-05-21 10:48:44
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韩颖715

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 彩虹之子1991 at 2015-09-16 22:29:34
酶联免疫法吸附法用板子包被一抗的时候 为什么洗液洗不掉   而在加入二抗的时候,没有和一抗结合的游离二抗会被洗掉。难道二抗就不会直接包被到板子上马?求指教

你网上查些资料学习下,会对你很有帮助。
5楼2015-09-17 12:58:55
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