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朱青青1988

新虫 (初入文坛)

[求助] 间接Elisa测中包被抗原浓度的选择

本人第一次做Elisa,不知道抗原浓度如何确定啊,对实验影响大吗?说一下详细的步骤吧,
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带刺毛毛虫

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, Send one rose fragrance in hand, thank you loosen one's purse strings generously, look forward to your wonderful 2013-06-14 14:06:32
一般包100ng/ml-----20ug/mi就可以了,每孔100ul。你可以设定几个不同倍比浓度包一次看看哪个浓度效果好
加油
2楼2013-06-14 10:00:09
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reninhat

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, Send one rose fragrance in hand, thank you loosen one's purse strings generously, look forward to your wonderful 2013-06-14 14:06:40
要做梯度,然后根据线性,选择适宜的浓度。
还有Buffer的离子浓度,PH值都需要筛选
3楼2013-06-14 10:02:00
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朱青青1988

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by reninhat at 2013-06-14 10:02:00
要做梯度,然后根据线性,选择适宜的浓度。
还有Buffer的离子浓度,PH值都需要筛选

哦,那再问一下,一般需要做几个重复啊
4楼2013-06-14 17:13:42
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137167741

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
朱青青1988: 金币+15 2013-06-14 18:00:03
一般来说,你需要做一个梯度稀释,逐级稀释,一般来说不做重复的,比如用八连管,一排八个,做八个稀释梯度,一下子就可以做出来的,不相信自己可以做2~3个重复
希望可以帮到你,试验顺利~~
总有一天我要修改用户名。
5楼2013-06-14 17:29:09
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gzl9901

铁杆木虫 (文坛精英)

very good

努力,再努力!再创佳绩!
verygood
6楼2013-06-14 18:19:38
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137167741

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 137167741 at 2013-06-14 17:29:09
一般来说,你需要做一个梯度稀释,逐级稀释,一般来说不做重复的,比如用八连管,一排八个,做八个稀释梯度,一下子就可以做出来的,不相信自己可以做2~3个重复
希望可以帮到你,试验顺利~~

顺便纠正自己的一个错误,elisa一般是用专门的96孔板的~~~呵呵
试验顺利~
总有一天我要修改用户名。
7楼2013-06-14 18:38:13
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yxncas-2012

木虫 (正式写手)

做三个重复就可以,少了不能说明问题,多了工作量就大了!
一般ELISA各个条件都是需要摸索最佳的,抗原浓度,抗体稀释倍数等!需要找到一个合适的浓度后,进行检测的结果,可信度比较高
8楼2013-06-15 17:25:16
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李树启

新虫 (初入文坛)

根据抗原性质而定,重组抗原一般要先拉6个梯度,2个复空,以10微克向下10倍稀释。我做的间接Elisa最适包被浓度0.001微克。
以诚交友,用心呵护。
9楼2014-09-15 12:51:13
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