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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 间接Elisa测中包被抗原浓度的选择
汕头大学海洋科学接受调剂
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朱青青1988

新虫 (初入文坛)

[求助] 间接Elisa测中包被抗原浓度的选择

本人第一次做Elisa，不知道抗原浓度如何确定啊，对实验影响大吗？说一下详细的步骤吧，
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1楼 2013-06-14 09:38:29
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带刺毛毛虫

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, Send one rose fragrance in hand, thank you loosen one's purse strings generously, look forward to your wonderful 2013-06-14 14:06:32
一般包100ng/ml-----20ug/mi就可以了，每孔100ul。你可以设定几个不同倍比浓度包一次看看哪个浓度效果好
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加油
2楼2013-06-14 10:00:09
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reninhat

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, Send one rose fragrance in hand, thank you loosen one's purse strings generously, look forward to your wonderful 2013-06-14 14:06:40
要做梯度，然后根据线性，选择适宜的浓度。
还有Buffer的离子浓度，PH值都需要筛选
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3楼2013-06-14 10:02:00
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朱青青1988

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by reninhat at 2013-06-14 10:02:00
要做梯度，然后根据线性，选择适宜的浓度。
还有Buffer的离子浓度，PH值都需要筛选

哦，那再问一下，一般需要做几个重复啊
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4楼2013-06-14 17:13:42
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137167741

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
朱青青1988: 金币+15 2013-06-14 18:00:03
一般来说，你需要做一个梯度稀释，逐级稀释，一般来说不做重复的，比如用八连管，一排八个，做八个稀释梯度，一下子就可以做出来的，不相信自己可以做2~3个重复
希望可以帮到你，试验顺利~~
赞一下(1人) 回复此楼
总有一天我要修改用户名。
5楼2013-06-14 17:29:09
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gzl9901

铁杆木虫 (文坛精英)

very good
努力，再努力！再创佳绩！
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verygood
6楼2013-06-14 18:19:38
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137167741

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 137167741 at 2013-06-14 17:29:09
一般来说，你需要做一个梯度稀释，逐级稀释，一般来说不做重复的，比如用八连管，一排八个，做八个稀释梯度，一下子就可以做出来的，不相信自己可以做2~3个重复
希望可以帮到你，试验顺利~~

顺便纠正自己的一个错误，elisa一般是用专门的96孔板的~~~呵呵
试验顺利~
赞一下(1人) 回复此楼
总有一天我要修改用户名。
7楼2013-06-14 18:38:13
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yxncas-2012

木虫 (正式写手)
做三个重复就可以，少了不能说明问题，多了工作量就大了！
一般ELISA各个条件都是需要摸索最佳的，抗原浓度，抗体稀释倍数等！需要找到一个合适的浓度后，进行检测的结果，可信度比较高
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8楼2013-06-15 17:25:16
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李树启

新虫 (初入文坛)
根据抗原性质而定，重组抗原一般要先拉6个梯度，2个复空，以10微克向下10倍稀释。我做的间接Elisa最适包被浓度0.001微克。
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以诚交友，用心呵护。
9楼2014-09-15 12:51:13
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