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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 请问pET28a是干嘛用的？
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jingmi

新虫 (正式写手)

[求助] 请问pET28a是干嘛用的？ 已有8人参与

大家好，请问pET28a是什么？干嘛用的？是某家公司特别制造的产品吗？

在分子检测中会用到吗？
能通俗地讲下它的用处吗？
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1楼 2015-02-02 16:07:20
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
打个比方说吧,你要把.人通过火箭送去月球.pet28a就是火箭,人就是基因.等人到了月球后,大量生的小孩就是目的蛋白.

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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采菊东篱下，悠然见南山。
4楼2015-02-02 23:36:43
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biofanie

铁虫 (正式写手)

虫友

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jingmi(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-02-05 22:11:28
用于蛋白质纯化，包含一个his tag, 因此可用nickle柱子纯化蛋白，是一个比较常用的载体，我经常用，好使。
其图谱和序列图见附件，作为你的参考，其中序列图上有详细的酶切位点图，可直接使用。
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  • 附件 1 : pET28.pdf
    • 2015-02-05 12:47:10, 39.42 K
  • 附件 2 : pET28a_map.dna
    • 2015-02-05 12:47:10, 39.05 K
你好，喜欢小木虫上丰富的资源，大部分资源的质量很高，对科研很有帮助啊
10楼2015-02-05 12:48:25
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普通回帖

ptttmt

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
jingmi(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-02-02 21:06:54
这问题问的。。。。。pET28a是原核表达载体啊，将外源基因克隆入该载体，在大肠杆菌中表达出目的蛋白。基因工程中常用的载体。
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2楼2015-02-02 18:12:27
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chikui

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
jingmi(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-02-02 21:07:04
pET28a是原核表达载体，带his tag，将外源基因克隆入该载体，在大肠杆菌中表达出目的蛋白，然后用Ni-TNA的beads挂his，纯化蛋白，这一系列还有pET30a等
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3楼2015-02-02 19:00:08
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jingmi(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-02-05 22:11:04
用处：pET是一种载体，可以将一段序列（目的基因）加到这个载体上，形成一个环状的质粒，然后 将这个质粒转入到大肠杆菌体内进行表达 ，能很好的将目的基因表达出来。
公司：Novagen一直致力于研发pET系统，还有自己的pET手册，很好
pET28a只是pET载体系列的其中之一，除此之外还有pET32a pET30a pET43.1a，pET系统是有史以来在大肠杆菌中克隆表达重组蛋白的功能最强大系统，除此以外还有pCold，pGH，pGEX等。
分子检测中会用到啊
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
5楼2015-02-03 09:06:17
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浅语8905

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jingmi(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-02-05 22:11:15
pET28a是原核表达载体，Ka抗性,其上的HisTag标签用于蛋白纯化，属于高拷贝质粒，表达蛋白时需要TPTG诱导，同时可能产生大量包涵体
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6楼2015-02-03 09:11:25
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 浅语8905 at 2015-02-03 09:11:25
pET28a是原核表达载体，Ka抗性,其上的HisTag标签用于蛋白纯化，属于高拷贝质粒，表达蛋白时需要TPTG诱导，同时可能产生大量包涵体

pET载体系列：一种类型需要加IPTG诱导
另一种类型不需要加IPTG诱导哦
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
7楼2015-02-03 09:39:51
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13227213581

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
原核表达载体的一种，invotrogen公司构建的经典pet系列，应用广泛。想表达什么，把你的目的基因插入相应的酶切位点就ok了
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justbesunshine
8楼2015-02-03 10:07:25
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可帅儿
9楼2015-02-05 12:12:58
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