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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » RNA提取测的值挺好的，为什么跑胶跑成这样
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青青雨季

新虫 (初入文坛)

[求助] RNA提取测的值挺好的，为什么跑胶跑成这样 已有3人参与

第一和第二个泳道的值是 260/280:2.10     260/230:2.0   浓度是2000多纳克  ，各位大神帮忙分析分析原因   ，是不是浓度太大了就不太对呀！！

RNA提取测的值挺好的，为什么跑胶跑成这样
mht1_副本.jpg
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1楼 2015-01-12 10:31:58
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
电压用110V，10min，用大孔跑电泳，会好点。尽量使用干净的电泳设备以防止电泳过程中降解，导致条带不好。你的值是很好的。
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4楼2015-01-12 10:57:25
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普通回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
青青雨季: 金币+5 2015-01-12 15:03:10
产物有明显拖带，而且产物量很少。即使是RNA提取时正常，也不能保证下一步操作对结果是没有影响的。
浓度应该是高了，200多纳克，请问你的模板是什么呀？
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
2楼2015-01-12 10:44:48
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哼哈啊啊啊a

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是跑太快了呀？

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2015-01-12 10:53:32
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青青雨季

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-01-12 10:44:48
产物有明显拖带，而且产物量很少。即使是RNA提取时正常，也不能保证下一步操作对结果是没有影响的。
浓度应该是高了，200多纳克，请问你的模板是什么呀？

我的模板是植物的花芽
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5楼2015-01-12 11:11:16
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青青雨季

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-01-12 10:57:25
电压用110V，10min，用大孔跑电泳，会好点。尽量使用干净的电泳设备以防止电泳过程中降解，导致条带不好。你的值是很好的。

你的意思是跑胶的过程中降解了，好的，我下次试试
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6楼2015-01-12 11:13:31
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青青雨季

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 哼哈啊啊啊a at 2015-01-12 10:53:32
是不是跑太快了呀？

电压150，电流150
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7楼2015-01-12 11:14:40
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫
引用回帖:
5楼: Originally posted by 青青雨季 at 2015-01-12 11:11:16
我的模板是植物的花芽...

植物的花芽，模板量为啥用200ng呢，浓度太大啦，人类基因组的也就用100ng，了不得了。
还有，跑电泳时候的电压，不要超过100V，琼脂糖凝胶电泳的电压一般40-60V差不多了，电压太高容易使条带产生弥散。跑胶过程中降解的可能性，个人认为很少的。
其他的应该没什么问题，希望对你有所帮助
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
8楼2015-01-12 11:22:23
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lzpbar

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-01-12 11:22:23
植物的花芽，模板量为啥用200ng呢，浓度太大啦，人类基因组的也就用100ng，了不得了。
还有，跑电泳时候的电压，不要超过100V，琼脂糖凝胶电泳的电压一般40-60V差不多了，电压太高容易使条带产生弥散。跑胶过程中 ...

琼脂糖凝胶电泳的电压跟槽子大小有关啊。一般5V/cm，槽子越大，两级之间距离越大，电压越大。。。
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举而措之天下之民，谓之事业
9楼2015-01-12 12:40:39
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by lzpbar at 2015-01-12 12:40:39
琼脂糖凝胶电泳的电压跟槽子大小有关啊。一般5V/cm，槽子越大，两级之间距离越大，电压越大。。。...

在不同平台做的实验都是一样的，所以默认都是一样的了。呵呵，明白，希望你能及时解决问题哟
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
10楼2015-01-12 13:01:09
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