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郭瑞坚001

金虫 (小有名气)

[求助] 提取幼虫全RNA,跑胶后照相结果却是这样,求大神解答~~~~~~

我提取昆虫幼虫的全RNA,照相图从左往右依次是6龄、5龄、3龄幼虫的RNA。跑完后最前面的5S条带特别亮,28S的条带特别暗,不知道这是怎么回事,maker用的是2000。求知道的同学帮忙分析一下吧。
提取幼虫全RNA,跑胶后照相结果却是这样,求大神解答~~~~~~
PQ_Image.jpg
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)

降解的很多呀

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2013-09-21 09:50:36
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郭瑞坚001

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Fleaves at 2013-09-21 09:50:36
降解的很多呀

我想知道为什么我的5S怎么这么亮啊?
3楼2013-09-21 17:47:20
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
郭瑞坚001: 金币+3, ★有帮助 2013-09-23 09:30:17
引用回帖:
3楼: Originally posted by 郭瑞坚001 at 2013-09-21 17:47:20
我想知道为什么我的5S怎么这么亮啊?...

18s 和 28s 降解 了,所以5S很亮
4楼2013-09-21 17:59:25
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weizhi111

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-09-22 08:13:33
郭瑞坚001: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-09-23 09:30:27
昆虫的RNA可能就是这样:28S比18S暗,我们实验室提的昆虫RNA都这样,但5S没有你这么亮,可能跟物种和虫子的龄期有关系,不同的物种18S,28S,5S的比例是不一样的,不一定都是书本上说的那样,做出来的结果和别人不一样很正常,不一定是降解(反正我觉得你的胶图不像是降解,跑胶时间稍微有点长,有一点儿拖尾,但总体还行)。你问问你们实验室其他人有没有提过你做的这种幼虫,看看他们的胶图是不是跟你的类似。
5楼2013-09-22 07:58:10
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refreshing11

新虫 (正式写手)

降解了,建议降低提取昆虫组织的用量,增加trizol的用量,不过因为28和18s条带都还在,你也可以进行反转录
6楼2014-08-19 22:10:50
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